特許
J-GLOBAL ID：200903089357772377
DNA解析方法及び試薬キット
発明者：
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出願人/特許権者：
代理人 (1件)：
小川 勝男
公報種別：公開公報
出願番号（国際出願番号）：特願平9-263186
公開番号（公開出願番号）：特開平10-174589
出願日： 1997年09月29日
公開日（公表日）： 1998年06月30日
要約：
【要約】【課題】 クローニングを用いないネステッドデリューションライブラリーの作成方法及び塩基配列決定方法を提供する。【解決手段】 試料DNA151を制限酵素を用いて切断して得たDNA断片(断片-1)を、16種類の選択プライマーセットを用いて各断片の増幅を行い、λエクソヌクレアーゼ、クレノーフラグメントにより各断片の一方の5’末端近傍のDNA152(断片-2)を得る。断片2、試料DNA151を用いてPCR反応を行い、断片-2と相補的な塩基配列を含みこの断片よりも長いDNA断片(第3の断片)158を得る。第3の断片は始端は共通であり、終端は制限酵素切断部位により異なる。各断片の制限酵素切断部位から塩基配列決定し、試料DNA151の全長の塩基配列決定を効率良く行う。
請求項（抜粋）：
(1)試料DNAを断片化し各断片を増幅して第1のDNA断片を得る工程と、(2)前記各第1のDNA断片から、少なくとも3’末端側が前記試料DNAと実質的に相補的な第2のDNA断片を得る工程と、(3)前記試料DNAを鋳型とし、前記第2のDNA断片と相補な塩基配列を含み前記第2のDNA断片より長い第3のDNA断片を相補鎖伸長反応で作成して、前記試料DNAの解析の鋳型とする工程とを有することを特徴とするDNA解析方法。
IPC (2件)：
C12N 15/09 ZNA
, C12Q 1/68
C12N 15/00 ZNA A
, C12Q 1/68 A
