特許
J-GLOBAL ID：200903000581336441
N末端アミノ酸が標識されたタンパク質の効率的な合成方法
発明者：
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出願人/特許権者：
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代理人 (3件)：
平木 祐輔
, 石井 貞次
, 藤田 節
公報種別：再公表公報
出願番号（国際出願番号）：JP2006323378
公開番号（公開出願番号）：WO2007-058376
出願日： 2006年11月16日
公開日（公表日）： 2007年05月24日
要約：
N末端標識法は,タンパク質のN末端のメチオニン残基のαアミノ基特異的に標識されたタンパク質を合成する方法である。従来法では,標識効率(合成されたタンパク質のうち,標識されたタンパク質の割合)が1-2%程度と極めて低かった。 本願発明者らは、(1)開始tRNAを除いた実質的に伸長tRNAのみからなるtRNA混合液を用い,さらにメチオニルtRNAトランスフォルミラーゼ,10-フォルミル5,6,7,8-テトラヒドロ葉酸を含まない合成系(in vitro転写・翻訳系)を利用する、(2)標識されたメチオニル開始tRNAを分離精製する、及び/又は(3)標識タンパク質合成反応時間も制御することによって、標識効率を大幅に改善した。
請求項（抜粋）：
以下の工程を含む標識されたアミノ酸をN末端に有するタンパク質の合成方法。
(1)tRNAとしては伸長tRNAのみを含むin vitro転写・翻訳系を調製する工程、
(2)標識されたアミノ酸が結合した開始tRNA(以下標識アミノ酸結合開始tRNAともいう)を精製する工程、並びに
(3)前記tRNAとしては伸長tRNAのみを含むin vitro転写・翻訳系に精製された標識アミノ酸結合開始tRNA及び目的とするタンパク質をコードする遺伝子を添加して、該遺伝子を鋳型としてタンパク質を合成する工程。
IPC (2件)：
FI (2件)：
C12P21/00 C
, C12N15/00 A
4B024AA20
, 4B024BA80
, 4B024CA11
, 4B024GA19
, 4B024GA30
, 4B024HA03
, 4B024HA08
, 4B024HA20
, 4B064AG01
, 4B064CA21
, 4B064CB30
, 4B064CC24
, 4B064CD01
, 4B064CD04
, 4B064CD13
, 4B064CD15
, 4B064CD19
, 4B064CE10
, 4B064CE14
, 4B064DA13
