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J-GLOBAL ID:201602242788284241   整理番号:16A0798569

マウスの成長ホルモン(GH) SHRNAを発現ベクターの構築およびその遺伝子サイレンシング効率を制御することができた。【JST・京大機械翻訳】

Construction of Controllable Mus Musculus Growth Hormone(GH) shRNA Expression Vector and Its Gene Silencing Efficiency
著者 (5件):
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巻: 23  号: 12  ページ: 1611-1616  発行年: 2015年 
JST資料番号: C2715A  ISSN: 1674-7968  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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成長ホルモン(GROWTH HORMONE, GH)は,下垂体分泌の一つから動物生体の成長を促進し、筋肉の発育、代謝などの重要な生理学的機能を調節するペプチドホルモンである。本研究ではマウス(MUS MUSCULUS)によってGH MRNA配列を1MGHに対する小ヘアピンRNA(SHORT HAIRPIN RNA,SHRNA)を設計して,融合型をMGH SHRNAベクターPSINGLEMGHAPOE-RTTA-TTS-SHRNA-RFP発現を制御ことが構築した。組換えベクターは小鼠垂体瘤ATT-20細胞にトランスフェクションし,培養液中にはドキシサイクリン誘導基質(DOXYCYCLIN, DOX)を添加した,蛍光顕微鏡を介して赤色蛍光蛋白質(RED FLUORESCENT PROTEIN, RFP)の発現を観察した。リアルタイム蛍光定量的PCR(QUANTITATIVE REALTIME PCR,QRT-PCR)及びWESTERN BLOT法により検出した細胞内MGHの発現変化を利用する。その結果,DOX誘導後,トランスフェクションしたGHを含むSHRNA組換えベクター細胞のMRNAの相対的レベルは,有意差はなかった。DOX誘導群と他の対照群の細胞において70%程度の低下より極めて有意であった(P<0.01)。発現は群GH,GH蛋白質も90%前後に低下した。他の各群間のGH MRNAおよび蛋白質の発現量の違いはなかった(P>0.05)。本研究で成功したことはGH発現制御 SHRNAベクターを構築し,細胞レベルで良く制御された遺伝子のサイレンシング効率があることを証明した,後続配合過発現のGH遺伝子システムを制御こと,GH制御遺伝子の発現レベルによってその成長発育及び関連疾患の発生における機序を研究した。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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遺伝子操作 

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