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J-GLOBAL ID：201602250273799381   整理番号：16A0320086

Pichia pastorisで発現した組換オンコナーゼの発現,精製と特性化【Powered by NICT】

Expression, purification and characterization of recombinant onconase expressed in Pichia pastoris

著者 (12件)： Yang Ganggang (Coll. of Life Sci., Henan Normal University; State Key Lab. Cultivation Base for Cell Differentiation Regulation ...) ,  Ma Chengkai (Coll. of Life Sci., Henan Normal University; State Key Lab. Cultivation Base for Cell Differentiation Regulation ...) ,  Zhang Quanyi (Henan Xinxiang Hua Xing Pharmaceutical Factory, Henan, Xinxiang) ,  Shi Shihui (Henan Xinxiang Hua Xing Pharmaceutical Factory, Henan, Xinxiang) ,  Wang Ze (Henan Xinxiang Hua Xing Pharmaceutical Factory, Henan, Xinxiang) ,  Lu Zhongyuan (Henan Xinxiang Hua Xing Pharmaceutical Factory, Henan, Xinxiang) ,  Wang Xuyang (Henan Xinxiang Hua Xing Pharmaceutical Factory, Henan, Xinxiang) ,  Xu Xiaoya (Coll. of Life Sci., Henan Normal University; State Key Lab. Cultivation Base for Cell Differentiation Regulation ...) ,  Cui Qingqing (Coll. of Life Sci., Henan Normal University; State Key Lab. Cultivation Base for Cell Differentiation Regulation ...) ,  Zhang Jihong (Coll. of Life Sci., Henan Normal University; State Key Lab. Cultivation Base for Cell Differentiation Regulation ...) ,  Zhang Ruigang (Coll. of Life Sci., Henan Normal University; State Key Lab. Cultivation Base for Cell Differentiation Regulation ...) ,  Xu Cunshuan (Coll. of Life Sci., Henan Normal University; State Key Lab. Cultivation Base for Cell Differentiation Regulation ...)
資料名： Shengwu Gongcheng Xuebao  (Shengwu Gongcheng Xuebao)
巻： 31  号： 11  ページ： 1632-1642  発行年： 2015年 
JST資料番号： C2184A  ISSN： 1000-3061  CODEN： SGXUED  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： ranpirnase(オンコナーゼ,ONC)は,新しい薬剤,in vitroで種々の腫瘍細胞への弱いRNアーゼ活性と強い細胞毒性およびin vivoである。本研究は,高い生物活性を持つ組換オンコナーゼ(rONC)を得ることである。Pichia pastorisのコドン選択性に基づいて設計し,ONCのcDNA配列とα交配因子のプレペプチドに従って遺伝子を合成した。著者らは,組換プラスミドをP.pastorisX-33,GSS115とSMD1168へ形質転換後の陽性クローンをスクリーニングした。著者らは異なる7ベクター及び宿主株の最良の組み合わせをスクリーニングした。さらに,著者らは,振とうフラスコと10Lバイオリアクタにおいて培養条件を最適化し,水溶液2相抽出結合G50分子排除法により0.25%メタノールで誘導後の上清からrONCを精製した。最高rONC産生は振とうフラスコでpH=5.5で23°Cの条件下で7日間pPICZα-A/33/ONCの13mg/Lであり誘導は7日間10Lバイオリアクター中でpH=5.5と低い基本塩培地で行われたとき,最高rONC生産は180mg/Lであった。rONCの収率は,95%以上の純度で90%以上であった。roncはin vitroで種々の腫瘍細胞を殺すことができる。rONCの発現と精製は,この新しい薬剤の更なる検討に有用と考えられる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： 最適化 ,  プラスミド ,  RNアーゼ ,  宿主 ,  *キャラクタリゼーション ,  形質転換 ,  細胞毒性 ,  in vitro実験 ,  クローン ,  生物活性 ,  培養条件 ,  腫瘍細胞 ,  pH【水素イオン指数】 ,  ベクター
準シソーラス用語： *Pichia pastoris , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (3件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  生化学一般  (EB01000O) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (6件)： Pichia ,  発現 ,  組換 ,  オンコナーゼ ,  精製 ,  特性化