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J-GLOBAL ID:201602269245217527   整理番号:16A0892790

髄膜炎球菌の表面蛋白質はFHBP融合とPORAの発現およびその免疫原性を【JST・京大機械翻訳】

Fusion expression and immunogenicity of Neisseria meningitidis surface proteins fHBP and PorA
著者 (8件):
資料名:
巻: 29  号:ページ: 124-128  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3083A  ISSN: 1004-5503  CODEN: ZSZZAP  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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髄膜炎球菌(NEISSERIA MENINGITIDIS, NM)の表面蛋白質はFHBP遺伝子組換え発現プラスミドの構築を目的とした,そしてPORA蛋白質融合発現と,単一抗原FHBPと融合抗原FHBP-PORAの免疫に対して原性検出を行った。この方法をそれぞれEへの転化をスクリーニングするFHBPとPORA遺伝子配列の最適化,設計フラグメントPORA接続FHBP C-端まで接続,組換え発現プラスミドPET-24B-FHBPとPET-24B-FHBPPORA-,E.COLI BL21 (DE3)コンピテント細胞が,IPTG誘導発現。発現した組換え蛋白質は親和性とクロマトグラフィーとゲル濾過クロマトグラフィー後、ウサギを免疫させ,抗血清は,間接ELISA、フローサイトメトリーと微量の血清殺菌力試験(SERUM BACTERICIDAL ASSAY,SBA)評価は抗原の免疫原性を採用する。結果は,二重酵素消化およびシークエンシングで同定を経て,2つの蛋白質の組換え発現プラスミドを正しく構築した。組換え蛋白質はFHBP可溶性形式で発現し,FHBP-PORA封入体発現,精製後,いずれも90%以上の純度。抗清滴度いずれも1.0 × 105以上。フローサイトメトリーとNMには特異的な結合が生じること,またFHBP-PORA一定の交差反応を示す抗血清抗血清は示した。FHBPとFHBP-PORA29019NMの殺菌力価は1:抗血清を128。結論:FHBPは良好な抗原性と免疫原性を持ち,B群髄膜炎ワクチン開発の展望を持つ。多抗原融合戦略を,より多くの最適化を考慮することが必要である。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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著者キーワード (5件):
分類 (3件):
分類
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クロマトグラフィー,電気泳動  ,  遺伝子操作  ,  生化学的分析法 
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