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J-GLOBAL ID：201702232909070205   整理番号：17A0205132

PIGGYBACにおけるトランスポザーゼの一過性発現は,IN VIVOでのPIGGYBACトランスポゾンの役割を果たす。【JST・京大機械翻訳】

Transposition of PiggyBac (PB) Element is Attributed to Transient Expression of PB Transposase in Chlamydomonas reinhardtii

著者 (6件)： Qi Shuyuan (School of Life Sciences, Zhejiang University) ,  Eshaghi Majid (Genome Institute of Singapore) ,  Sun Deying (Genome Institute of Singapore) ,  He Jing (Ocean Research Centre of Zhoushan, Zhejiang University) ,  Yang Xiaohang (School of Life Sciences, Zhejiang University) ,  Liu Jianhua (Ocean College, Zhejiang University)
資料名： Nongye Shengwu Jishu Xuebao  (Nongye Shengwu Jishu Xuebao)
巻： 24  号： 11  ページ： 1643-1651  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2715A  ISSN： 1674-7968  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： PIGGYBAC系は遺伝的修飾のツールとして、哺乳類、昆虫、酵母などの多くの生物体に広く応用されている。しかし、現在、PIGGYBAC系は緑藻-CHLAMYDOMONAS(CHLAMYDOMONAS REINHARDTI)において活性が少ないかどうかについて研究が少ない。本研究では,コピーあるいは複数コピーを含み,PIGGYBACの座要素を安定的に発現できるCHLAMYDOMONASを構築した。次に,一般的PIGGYBAC変換器とコドン最適化後のPIGGYBAC変換器を,転座要素を含む株において一時的に表現した。制限断片長多型(RESTRICTION FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISM,RFLP)によりPIGGYBACの転座要素の転座現象を分析した。トランスポザーゼはコナミドリムシ細胞内に1週間と2週間後に移行前のRFLP画像と比較して有意な差があった。1週間後のTR1株の1.5KBサイズのフラグメントは消失し,同時に3つの新しいフラグメントが出現した。2.8,4.2,および6.5KBであった。2週間後,これら3つのフラグメントは変化し,転座現象が存在し持続的に発生することを示した。コドン最適化後にトランスポザーゼ1週間後のTR3株では1.5,3および4KBサイズのフラグメントは変化しなかったが,6.5KBサイズのフラグメントは消失し,それに伴って2.8KBサイズのフラグメントが新たに出現した。2週間後に,TR3の制限断片の多型は変化しなかった。トランスポザーゼが細胞に成功したかどうかを検出するために、著者らは新たなアダプター配列の両側でフランキングPCRを行い、同時にPCR産物に対して配列比較分析を行った結果、以下のことが分かった。PIGGYBACトランスポゾンは,非常に非常に位の5’-TTT-3’と5’-ACGCAG-3’でせん断されるが,性の切断部位は5’-TTAA-3’で発生する。研究結果により、PIGGYBACPIGGYBACはコナミドリムシ体内のPIGGYBACトランスポゾンに対して転座作用を持ち、PIGGYBAC転座系統はコナミドリムシの遺伝学的修飾に用いることができることが明らかになった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 哺乳類 ,  変換器 ,  Chlamydomonas reinhardtii ,  昆虫類 ,  遺伝学 ,  *トランスポゾン ,  酵母 ,  転座 ,  遺伝 ,  アダプタ ,  緑藻類 ,  *トランスポザーゼ ,  RFLP
準シソーラス用語： 比較分析 ,  コドン最適化 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Genetic modification ,  Green microalgae ,  Illegitimate excision ,  PiggyBac transposon ,  RFLP

分類 (2件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (5件)： piggyBac ,  トランスポザーゼ ,  一過性発現 ,  トランスポゾン ,  役割