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J-GLOBAL ID:201702236361230487   整理番号:17A0793599

Escherichia coliにおけるマウスネスファチン-1の発現,精製及び特性化【Powered by NICT】

Expression, purification, and characterization of mouse nesfatin-1 in Escherichia coli
著者 (7件):
資料名:
巻: 64  号:ページ: 43-49  発行年: 2017年 
JST資料番号: T0058A  ISSN: 0885-4513  CODEN: BABIEC  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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ネスファチン-1は視床下部核で発現した新たに発見された満腹分子である。短期および長期の食欲を抑制する。PCRをコードするネスファチン-1と重なる六種の合成デオキシオリゴヌクレオチドは中間で組み込まれたエンテロキナーゼ認識部位を有するヘキサ-ヒスチジン標識多重クローニング部位配列後pET28aベクターにクローン化した。組換えプラスミドは,融合蛋白質,全細胞蛋白質の27%を構成することを発現する大腸菌株Rosettaに変換した。Niセファロースアフィニティークロマトグラフィーによる精製後に,融合蛋白質はエンテロキナーゼを用いるネスファチン-1放出を処理した。ネスファチン-1試料は,逆相高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により精製し,その分子量を質量分析により決定した。組換えネスファチン-1の生物学的活性もin vivo動物モデルを用いて評価した。ここで述べた方法は,E.coliの1L振盪フラスコ培養,ネスファチン-1を合成するための簡単で費用対効果に優れた方法として考えられるから98%以上の均一性を持つ約8mgの生物学的に活性なネスファチン-1産生を示唆した。Copyright 2017 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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遺伝子操作  ,  遺伝子発現 

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