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J-GLOBAL ID：201702236815294406   整理番号：17A0411568

慢性関節リウマチのためのニワトリII型コラーゲンをコードする新規治療DNAワクチン生産のために工学したEscherichia coli株の遺伝的安定性【Powered by NICT】

Genetic stability of an Escherichia coli strain engineered to produce a novel therapeutic DNA vaccine encoding chicken type II collagen for rheumatoid arthritis

著者 (9件)： Juan Long (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Xiao Zhao (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Fang Yuan (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Fei Liang (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Nan Liu (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Song Yun (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Ling Wang (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Yuying Sun (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China) ,  Yongzhi Xi (Department of Immunology and National Center for Biomedicine Analysis, Beijing 307 Hospital Affiliated to Academy of Military Medical Sciences, No.8, Dongda Ave, Fengtai District, Beijing, 100071, PR China)
資料名： Process Biochemistry  (Process Biochemistry)
巻： 52  ページ： 86-93  発行年： 2017年 
JST資料番号： C0250B  ISSN： 1359-5113  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： CD4~+CD25~+FoxP3+調節およびCD3~+CD8~+C28サプレッサーT細胞の誘導,および/または自己反応性CD4~+CD28+1型ヘルパーT細胞と自己抗体産生B細胞の両方の阻害を介して免疫寛容を回収できる治療用DNAワクチンの開発はリウマチ性関節炎の治療のための有望な新しい戦略を提供する。以前に著者らは,pcDNA CCOL2A1,新規治療用DNAワクチン,全長ニワトリII型コラーゲン配列をコードを開発し,関節リウマチを治療するためのこのワクチンの有効性は現在の「金標準」処理,メトトレキセートのそれに匹敵したことを実証した。本研究では,種々の温度で連続継代および長期貯蔵中のワクチンを生産するための遺伝子操作株の遺伝的安定性を検討した。12株のパネルをスクリーニングし,15時間培養後にpcDNA CCOL2A1生産の高レベル(12.30±0.05mgL~( 1))を示し,続いて将来の研究のための三段階細胞バンクを確立するためにこの菌株を利用したDH5α株を同定した。100接種時間のこの株の連続継代は細胞のより高い割合(>95%)は非選択的条件下よりも選択圧(アンピシリン)下で培養したとき,プラスミドを維持し,培地中の抗生物質の存在はpcDNA CCOL2A1プラスミドの損失を防止することを示唆した。一方,制限酵素消化と遺伝子配列分析はpcDNA CCOL2A1ベクトルは安定していたこと,およびプラスミド配列はこの期間中に保存されていたことを示した。最後に,DH5αpcDNA CCOL2A1株は 80°Cで60か月間の貯蔵後に高いプラスミド保存(>90%)と高レベルプラスミド生産(9.05mgL~( 1))を示した 80°Cで60か月間の貯蔵後DH5αpcDNA CCOL2A1株から抽出したプラスミドはCOS-7細胞へトランスフェクトしたさらに,標的蛋白質ニワトリII型コラーゲンを発現した。逆に,この株は 20°Cと4°Cでの貯蔵を24および18か月後の完全な消失を示した。これらの知見は,新規治療ワクチンpcDNA CCOL2A1,工業規模生産も,さらにパイロット規模の試験を容易にするであろう。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： DNA制限酵素 ,  免疫トレランス ,  *DNAワクチン ,  反応性 ,  プラスミド ,  ヘルパーT細胞 ,  継代培養 ,  抗体産生 ,  *治療法 ,  *ワクチン ,  アミノ酸 ,  芳香族化合物 ,  ラクタム ,  硫黄複素環化合物 ,  第一アミン
準シソーラス用語： COS7細胞 ,  遺伝子配列 ,  *遺伝的安定性 ,  *コラーゲンII , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 治療用DNAワクチン ,  ニワトリII型プロコラーゲン ,  工学的Escherichia coli ,  遺伝的安定性 ,  3層種子バンク

分類 (3件)： 植物組織・細胞による物質生産  (FK03050H) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  酵素一般  (EB09010D)

物質索引 (1件)： アンピシリン

タイトルに関連する用語 (9件)： 慢性関節リウマチ ,  ニワトリ ,  II型コラーゲン ,  治療 ,  DNAワクチン ,  工学 ,  Escherichia ,  株 ,  遺伝的安定性