アセチルコリンシグナルペプチドがその活性機能に及ぼす影響に関する研究【JST・京大機械翻訳】

LI YanJie; MA YuanFang; LI JiXue; TANG GuoYing; PENG QingZhong; ZHU HouChu

文献

J-GLOBAL ID：201702238131348767 整理番号：17A0675509

アセチルコリンシグナルペプチドがその活性機能に及ぼす影響に関する研究【JST・京大機械翻訳】

Impact of signal peptide on post-translation and activation process of heparanase

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資料名：
巻： 32 号： 2 ページ： 129-132,158 発行年： 2008年
JST資料番号： C2452A ISSN： 1000-5501 CODEN： JYKYEL 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

目的;アセチルコリンは腫瘍転移過程において重要な役割を果たし、そのシグナルペプチドはこの酵素の翻訳後処理過程において重要な役割を果たす。本研究の目的は,哺乳類細胞におけるアセチルコリンの発現特性とその機能に対するそのシグナルペプチドの影響を調べることである。方法;ヒト胎盤CDNAライブラリーから拡増乙Xian遺伝子をクローン化し,PGEM-Tベクターにクローニングし,配列決定した。この遺伝子の全長とシグナルペプチド遺伝子を含まない配列をそれぞれ真核生物発現ベクターPCDNA4.1/4.1/-HISに挿入し、PCDNA4.1/MYC-HIS FULL HPAとPCDNA4.1/MYC-HIS PART HPAを構築した。COS-7細胞を一過性に発現させ、これら2種類のアセチルコリンの発現特性及び機能活性を分析した。【結果】;アセチルコリン遺伝子遺伝子をトランスフェクトしたCOS-7細胞の溶菌液において、この酵素の機能活性及び大きさ約53×103(MR)の標的タンパク質の免疫ブロットの発現バンドを検出し、切断活性化後にアセチルコリンのサブユニットとタグタンパク質の体付きを切断した。シグナルペプチドをノックアウトしたヘパラナーゼ遺伝子を導入したCOS-7細胞の切断液において、切断されない活性化された大きさ約65×103(MR)の標的タンパク質の免疫ブロットの発現バンドを測定し、この酵素の機能活性を検出できなかった。結論;COS-7細胞で発現した完全なヘパラナーゼタンパク質とシグナルペプチドを含まないヘパラナーゼタンパク質はいずれも細胞内に位置し、細胞外に分泌されず、この酵素は正常な状態で主に細胞内に分布していることを提示した。シグナルペプチドを含む酵素タンパク質は翻訳後処理中に細胞内のプロテアーゼにより2つのサブユニットに切断され、活性化され、機能活性を有する。シグナルペプチドを含まない酵素タンパクは切断されず、活性がある酵素となり、ヘパラナーゼのシグナルペプチドが翻訳後の加工、活性化過程に重要な影響を与えることが示唆された。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

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微生物の生化学 , 動物の生化学 , 細胞生理一般 , 酵素一般

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