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J-GLOBAL ID:201702240381635131   整理番号:17A0073884

新疆フタ抗体ファージディスプレイライブラリーの多様性のバイオインフォマティクス解析【JST・京大機械翻訳】

Analysis of the Diversity of VHH Library from Bactrian Camel (Camelus bactrianus) with Bioinformatics
著者 (4件):
資料名:
巻: 53  号:ページ: 1533-1538  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3029A  ISSN: 1001-4330  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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[目的]ラクダの免疫系には重鎖抗体のみが存在し、その可変領域のWHH断片は最も小さい天然抗体断片である。フタ遺伝子の配列解析により,二重遺伝子の特徴を調べ,VHHライブラリーの多様性を分析した。【方法】すべての抗体遺伝子フラグメントを,新疆 VHHの特異的プライマーを用いて増幅し,M13ファージミドベクターに連結し,ファージディスプレイライブラリーを構築するために,PIII蛋白質と融合させた。遺伝子配列決定とコロニーPCR法により,ライブラリーサイズと陽性クローン挿入率を分析した。NCBI--ツールは抗体配列に対してIMGT番号の命名を行い、ツールツールは抗体の保存配列の分布頻度を分析し、MEGA6ソフトウェアはVHH配列に対して相同性比較と系統樹の構築を行った。【結果】免疫化された新疆のリンパ球を用いて,1.4×109の容量のファージ抗体ライブラリーを構築した。91のランダム選択したライブラリーTG1コロニーをPCRにより増幅した。結果は,ライブラリーの陽性率が97%であり,DNA配列決定の結果,ライブラリーの多様性が97.8%であることを示した。91個のクローンDNA配列の分析結果により、これらの遺伝子のうち2つは通常のVH抗体以外に、残りは重鎖の抗VHH抗体であることが明らかになった。抗体配列中の特徴アミノ酸の分布により,91個の抗体配列を7つの亜群に分割した。【結論】新疆のフタ VHHのライブラリーは多様性が高く,生物情報学的分析はライブラリーにおける多様性クローンの分布と特性を明らかにし,新疆のファージディスプレイライブラリーの更なる構築に役立つ。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (2件):
分類
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バイオアッセイ  ,  抗原・抗体・補体の生化学 
タイトルに関連する用語 (5件):
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