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J-GLOBAL ID:201702240766506266   整理番号:17A0300861

エビ蛋白質ホスファターゼ1サブユニットΒサブユニットのクローン発現と特性解析【JST・京大機械翻訳】

Cloning,Expression and Characterization of Protein Phosphatase 1 Catalytic Subunit Beta Isoform in Shrimp Fenneropenaeus chinensis
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巻: 46  号: 11  ページ: 73-81  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2597A  ISSN: 1672-5174  CODEN: ZHDXB3  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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本論文では、RACE(RAPID-AMPLIFICATION OF CDNA ENDS)技術を用いて、中国クルマエビ(FENNEROPENAEUS CHINENSIS)のプロテインホスファターゼ1サブユニットΒ(PROTEIN PHOSPHATASE 1CATALYTIC SUBUNIT BETA BETA)をクローニングし、獲得した。この遺伝子の長さは1BPであり、328BPのオープンリーディングフレームを含み、328アミノ酸をコードしている。相同性分析により、中国のエビのPP1Βアミノ酸配列は異なる種類のPP1Βとの類似性が90%~91%に達し、高度保守性を示した。多重配列アラインメントの結果,異なる種のPP1Βはセリン/トレオニン特異的蛋白質ホスファターゼファミリーの特徴モチーフモチーフ,,及びGNHEを含むことが示された。系統樹分析により、甲殻類のPP1Βは一つの枝に属し、中国のエビのPP1Βと (LITOPENAEUS VANNAMEI)は一つの枝ににいることが分かった。リアルタイム蛍光定量PCR分析により、PP1Βは健康な中国エビの各組織において、いずれも異なる程度の発現があり、その中で生殖腺において発現が最も高く、血細胞がその次であることが分かった。白斑症ウイルス(WHITE SPOT SYNDROME VIRUS,WSSV)は感染した健康な中国でエビを感染させた後、血細胞と生殖腺中のPP1Β遺伝子はいずれもアップレギュレーションし、12Hでピークに達し、しかも血細胞での発現上昇は更に顕著であった。組換え発現ベクターPET28A-PP1Βを構築し,大腸菌に形質転換し,組換えPP1Β蛋白質(RPP1Β)を発現させ,分子量は41KDAであった。親和性クロマトグラフィーにより精製したRPP1ΒをBALB/Cマウスに免疫化し、中国のエビ血液細胞株を作製し、間接免疫蛍光法によりPP1Βの血細胞中の分布状況を測定した結果、中国のエビのPP1Βは血細胞の核内及び細胞質内に分布していることが分かった。本研究の結果は,中国のエビのPP1ΒとWSSV感染の間の相互関係をさらに解析するためのデータを提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  遺伝子の構造と化学 

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