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J-GLOBAL ID：201702241420088693   整理番号：17A0268145

フウセイチロシンキナーゼ遺伝子クローニングと原核発現解析【JST・京大機械翻訳】

Cloning and Prokaryotic Expression Analysis of Tyrosine Kinase Gene in Large Yellow Croaker

著者 (6件)： Zhang Zaipeng (Fisheries College,Jimei University,Engineer Research Center of Eel Modern Industry Technology,Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea,Ministry of Agriculture) ,  Lin Peng (Fisheries College,Jimei University,Engineer Research Center of Eel Modern Industry Technology,Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea,Ministry of Agriculture) ,  Guo Songlin (Fisheries College,Jimei University,Engineer Research Center of Eel Modern Industry Technology,Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea,Ministry of Agriculture) ,  Wang Yilei (Fisheries College,Jimei University,Engineer Research Center of Eel Modern Industry Technology,Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea,Ministry of Agriculture) ,  Zhang Ziping (College of Animal Science,Fujian Agriculture and Forestry University) ,  Feng Jianjun (Fisheries College,Jimei University,Engineer Research Center of Eel Modern Industry Technology,Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea,Ministry of Agriculture)
資料名： Shengwu Jishu Tongbao  (Shengwu Jishu Tongbao)
巻： 32  号： 11  ページ： 180-187  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2986A  ISSN： 1002-5464  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： フウセイ CROCEAのTリンパ球チロシンキナーゼ(LYMPHOCYTE CELL KINASE,LCK)の遺伝子構造と機能を研究する。RT-PCRとRACE技術を用いて,フウセイ 遺伝子(遺伝子)の完全長CDNA配列をクローン化し,リアルタイム蛍光定量的PCR(QRT-PCR)を用いて,各器官における遺伝子発現を検出した。同時に,LCLCK遺伝子の原核発現ベクターを構築し,大腸菌において効率的に発現した。その結果,LCLCK遺伝子の全長は2BPであり,オープンリーディングフレームは1BPであり,501アミノ酸をコードすることを示した。この蛋白質は非受容体チロシンキナーゼSRCファミリーの典型的なSH3、SH2とTYRKCの三つのドメインを持ち、そのN末端にはGCXCSとCXXCモチーフが含まれている。C末端に2つのヒトLCK遺伝子中のTYR(394)とTYR(505)と一致する保存的チロシンサイトが出現した。系統樹は,LCLCKとと(LCK G)のLCKが一つの枝であることを示した。LCLCK遺伝子は雌雄の各臓器組織に発現し、その中で主要な免疫臓器の脾臓、頭腎と鰓に高豊度の発現があり、雌の個体の発現量は雄の個体より高い。胚の発育過程において、LCLCK遺伝子の発現レベルは多細胞期、胞胚期と原腸胚期で比較的高く、胞胚期にピーク値に達し、卵黄栓期の形成期は顕著に低下し、眼胞期には期の持続的な低下が見られ、一方、培養期には幼生が上昇した。構築した原核発現ベクターPGEX-4T-2-LCKは大腸菌で発現することができ、その新規組換えタンパク質バンドはSDS-PAGE電気泳動測定で約84KDであり、予期した発現の分子量と一致した。フウセイは雌雄の成熟個体の細胞免疫応答および胚発生過程におけるTリンパ球免疫臓器の形成に密接に関連している。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： クローン ,  RT-PCR法 ,  SDS-PAGE ,  胞胚 ,  胚発生 ,  内臓 ,  定量的PCR法 ,  *チロシンキナーゼ ,  ヒト ,  *遺伝子 ,  *遺伝子クローニング ,  脾臓 ,  分子量 ,  系統樹
準シソーラス用語： 発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Larimichthys crocea ,  LCK gene ,  embryonic development ,  prokaryotic expression

分類 (2件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  動物の生化学  (EJ01050P)

タイトルに関連する用語 (2件)： 遺伝子クローニング ,  発現解析