文献

J-GLOBAL ID：201702241777446587   整理番号：17A0161919

5A遺伝子の最適化とPICHIA PASTORISにおけるそれらの効率的発現を研究した。【JST・京大機械翻訳】

Gene optimization and efficient expression of Trichoderma reesei Cel5A in Pichia pastoris

著者 (7件)： Bai Renhui (Laboratory of Industrial Biotechnology of Department of Education, Jiangnan University, Jiangsu Key Laboratory of Biomass-based Green Fuels and Chemicals) ,  Zhang Yunbo (Laboratory of Industrial Biotechnology of Department of Education, Jiangnan University) ,  Wang Chundi (Laboratory of Industrial Biotechnology of Department of Education, Jiangnan University) ,  Zhang Feiyang (State Key Laboratory of Motor Vehicle Biofuel Technology, Henan Tianguan Group Co., Ltd) ,  Zhe Zhang (State Key Laboratory of Motor Vehicle Biofuel Technology, Henan Tianguan Group Co., Ltd) ,  Sun Fubao (Laboratory of Industrial Biotechnology of Department of Education, Jiangnan University) ,  Zhang Zhenyu (Laboratory of Industrial Biotechnology of Department of Education, Jiangnan University)
資料名： Shengwu Gongcheng Xuebao  (Shengwu Gongcheng Xuebao)
巻： 32  号： 10  ページ： 1381-1394  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2184A  ISSN： 1000-3061  CODEN： SGXUED  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： エンドヌクレアーゼ5A欠乏はセルロース酵素の天然酵素を効率的に加水分解するための鍵となる因子である。本研究では,効率5Aの天然分泌の不足を克服するために, 5A遺伝子の発現と発現ベクターPPIC9K-EG2を構築するために,効率5A遺伝子を効率的に発現するPICHIA PASTORISの組換え株を構築した。PICHIA PASTORISのPICHIA PASTORISのGS115-EG IIを,PICHIA PASTORIS GS115に変換し,濃度勾配プレートと振盪フラスコ発酵によりスクリーニングした。組換え酵素の酵素的性質の分析により、この酵素の分子量は50KDA、最適PH(PH 4.5)はやや低下し、最適反応温度は60°Cであり、特異的に非結晶性セルロースに作用し、天然の 5Aとは明らかな差がないことが分かった。振盪フラスコ発酵の予備的最適化により,振盪フラスコの培養条件を最適化した。培養温度28°C,初期PH5.0,接種量2%,24時間毎にメタノール1.5%(V/V),24時間毎にソルビトール4G/LおよびTWEEN80を4G/L添加し,192時間の発酵後,組換え酵素活性は24.0U/MLに達した。さらに,よる(5L)を180時間発酵させたとき,CEL5Aの酵素活性は270.9U/MLに達し,蛋白質含有量は4.16G/Lに達した。組換え型PICHIA PASTORIS P。PASTORIS GS115-EG IIは,外5Aの外因性発現に適合する工学的菌株であり,そして,それは,天然の分泌5Aの代わりに,現在の遺伝子におけるリグノセルロースの効率的加水分解に適用することができた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 濃度勾配 ,  *最適化 ,  反応温度 ,  発酵 ,  酵素活性度 ,  セルロース ,  リグノセルロース ,  培養条件 ,  分子量 ,  酵素
準シソーラス用語： 菌株 ,  組換体 ,  培養温度 ,  組換酵素 ,  発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： Pichia pastoris GS115-EG II ,  Trichoderma reesei Cel5A gene ,  AOX1 promoters ,  codon bias ,  fermentation optimization ,  CMC enzyme activity

分類 (2件)： 微生物酵素の生産  (FK03030L) ,  酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (5件)： 遺伝子 ,  最適化 ,  Pichia ,  発現 ,  研究