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J-GLOBAL ID：201702242470336481   整理番号：17A0279798

ロイシンデヒドロゲナーゼの高効率共発現と大腸菌におけるグルコースデヒドロゲナーゼ【Powered by NICT】

High efficient co-expression of leucine dehydrogenase and glucose dehydrogenase in Escherichia coli

著者 (4件)： Yang Xinglong (Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University) ,  Mu Xiaoqing (Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University) ,  Nie Yao (Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University) ,  Xu Yan (Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University)
資料名： Weishengwu Xuebao  (Weishengwu Xuebao)
巻： 56  号： 11  ページ： 1709-1718  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2382A  ISSN： 0001-6209  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】大腸菌におけるロイシンとと遺伝子の発現に及ぼす異なる二重遺伝子共発現戦略の影響を研究することによって,高の効率的不斉合成を達成するために,高い補酵素再生効率を持つ二重酵素共発現バイオ触媒を得た。【方法】以来(BACILLUS CEREUS)のロイシン(LDH)とBACILLUS SP.からのグルコース(GDH)を鋳型として用いて,単一プラスミドの共発現を研究した。組換え型細胞におけるロイシンとグルコースの活性に及ぼす3つの共発現戦略の影響を研究するために,二重酵素の共発現と融合発現の3つの共発現戦略を用いて,-酸の非対称還元に及ぼす-の影響を比較した。[結果]研究により、異なる共発現策略がロイシン脱水素酵素とブドウ糖脱水素酵素の影響に対して明らかな差異が存在することが分かった。ロイシンは異なる戦略下で正常に発現するが、ブドウ糖脱水素酵素は融合発現時に活力がなく、C末端にヒスチジンタグが含まれる場合、発現タンパクの活性は低い。発現の最適化により,3つの株とグルコースが効率的に発現し,異なる酵素活性を持つ組換え菌が得られた。粗酵素と全細胞形での触媒効率を比較し,酵素活性と触媒形式が不斉還元反応効率に重要な影響を及ぼすことを見出した。C末端にHISタグを持たない組換え型Eを,単一プラスミドのC末端に発現させた。E.COLI BL21/PET28A-L-SD-AS-Gを最適触媒として使用し,0.5MOL/Lの基質を15MMOL/Lの基質に変換し,0.1MMOL/LのFuMei量を得た。[結論]単質粒の共発現戦略を用いて、1つの高いロイシン脱水素酵素とグルコース脱水素酵素活性を持つ組換え菌を構築し、効率的なTMP合成L-TLEを実現した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： 基質 ,  バイオ触媒 ,  不斉合成 ,  プラスミド ,  *グルコースデヒドロゲナーゼ ,  *デヒドロゲナーゼ ,  補酵素 ,  最適化 ,  酵素 ,  酵素活性度 ,  ヘキソース ,  アルドース ,  脂肪族アミン ,  脂肪族カルボン酸 ,  分枝鎖アミノ酸
準シソーラス用語： C末端 ,  組換体 ,  *共発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： L tert ロイシン ,  ロイシン脱水素酵素 ,  グルコースデヒドロゲナーゼ ,  共発現 ,  C末端 ,  His標識

分類 (2件)： 酵素の応用関連  (EB09100B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

物質索引 (2件)： グルコース ,  ロイシン

タイトルに関連する用語 (5件)： ロイシンデヒドロゲナーゼ ,  高効率 ,  共発現 ,  大腸菌 ,  グルコースデヒドロゲナーゼ