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J-GLOBAL ID:201702242985691613   整理番号:17A0060615

【結語】SIRNAはヒツジの胚線維芽細胞におけるLIG4遺伝子の発現を増加させ,組換えベクターベクターの効率を増加させる。【JST・京大機械翻訳】

Increasing the efficiency of homologous recombination vector-mediated end joining repair by inhibition of Lig4 gene using siRNA in sheep embryo fibroblasts
著者 (7件):
資料名:
巻: 38  号:ページ: 831-839  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2546A  ISSN: 0253-9772  CODEN: ICHUDW  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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動物細胞において、非相同末端連結(NON-HOMOLOGOUS END JOINING, NHEJ)の修復経路を抑制する。相同組換え(HOMOLOGOUS RECOMBINATION,HR)修復遺伝子遺伝子(破壊-STRAND BRAKES, DSBS)の発生確率を高めることができる。ヒツジ胚線維芽細胞のHR効率を向上させるために,NHEJ修復経路における重要な因子であるLIG4(DNA LIGASE 4)遺伝子について,4つの標的を持つSIRNA(SMALL INTERFERING RNA)を設計し合成した。ヒツジ胚線維芽細胞を電気によりSIRNAに導入し,リアルタイム蛍光定量PCR(QRT-PCR)とWESTERN BLOTTING検出により,LIG4遺伝子発現を効果的に抑制する2つのSIRNAをスクリーニングした。プラスミド重連法を用いてHR修復効率を測定し、I-SCEIMei線性化のHRプラスミドとSIRNAを共同でヒツジ胚胎線維芽細胞にトランスフェクションし、72H培養とフローサイトメトリーにより、HRプラスミドの再効率が3~4倍向上したことを示した。瞬間4遺伝子の発現は,HRの効率を改善し,ヒツジ胚線維芽細胞の遺伝子効率を改善するための理論的基礎を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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遺伝子操作 

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