文献

J-GLOBAL ID：201702243362270988   整理番号：17A0528904

トウモロコシにおけるチトクロームCオキシダーゼサブユニットIIIのクローニングと発現を分析した。【JST・京大機械翻訳】

Cloning and Expression Analysis of Cytochrome C Oxidase Subunit III from Sitophilus zeamais

著者 (7件)： Hou Changliang (Research & Development Center of Bioration Pesticide, Northwest A&F University) ,  Wang Jingbo (Research & Development Center of Bioration Pesticide, Northwest A&F University) ,  Li Yongqiang (Research & Development Center of Bioration Pesticide, Northwest A&F University, Research Center of Biopesticide Technology & Engineering) ,  Wu Hua (Research & Development Center of Bioration Pesticide, Northwest A&F University, Research Center of Biopesticide Technology & Engineering) ,  Ma Zhiqing (Research & Development Center of Bioration Pesticide, Northwest A&F University, Research Center of Biopesticide Technology & Engineering) ,  Feng Juntao (Research & Development Center of Bioration Pesticide, Northwest A&F University, Research Center of Biopesticide Technology & Engineering) ,  Zhang Xing (Research & Development Center of Bioration Pesticide, Northwest A&F University, Research Center of Biopesticide Technology & Engineering)
資料名： Zhongguo Nongye Kexue  (Zhongguo Nongye Kexue)
巻： 49  号： 23  ページ： 4544-4554  発行年： 2016年 
JST資料番号： W1459A  ISSN： 0578-1752  CODEN： CKNYAR  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】本研究の目的は,チトクロームCオキシダーゼサブユニットIII(COX III)の完全長CDNAをクローン化し,それらの配列解析と原核発現を行うことである。【方法】NCBI COXのCOX IIIの既知の部分配列をNCBIデータベースにおいて発見し,RT-PCRおよびRACE技術を用いて,玉 COXのCOX IIIの完全長配列をクローン化した。完全長CDNA配列,系統発生関係,基本的物理化学的性質および三次元構造を,DNAMAN8.0,MEGA5.1,GENEDOC,,およびTARGETP1.1ソフトウェアを用いて分析した。玉遺伝子を,それぞれベクター-BLUNT E1,PET28A,PET30A,PET32A,PET42Aと連結した。原核生物発現ベクターベクター-BLUNT E1-COX III,PET28A-COX III,PET30A-COX III,PET32A-COX III,PET42A-COX IIIを構築し融合蛋白質の発現は,IPTG誘導濃度,温度および時間によって誘発され,SDS-PAGEおよびウエスタンブロット法(WB)によって確認された。【結果】玉 COXの完全長CDNA配列のオープンリーディングフレーム(ORF)は792BPであり,263アミノ酸をコード化し,蛋白質の分子量は約30DAであり,理論的PIPIは6.51であった。予測分子式はC_(1492)H_(2154)N_(338)O_(362)S_(10)であり,不安定性係数は34.49であり,総親水性係数は0.492であり,疎水性の安定系統樹は,玉とと 科の昆虫類の間の進化関係が最も近いことを示した。原核生物発現の結果により、このタンパクは18°C、1 MMOL・L~(-1) IPTGで24時間誘導した条件下で融合タンパクの発現を実現でき、可溶性の測定によりウエスタンブロットにより,大腸菌BL21(DE3)において約62KDの分子量を有する融合蛋白質を発現させた。【結論】COX 昆虫からの完全長CDNA配列のクローニングに成功し,コード蛋白質の原核発現を達成し,これらの結果は,玉 COXにおけるCOX-IIIの機能とイソフラボンの機構にData from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ウェスタンブロット法 ,  分子量 ,  系統発生 ,  疎水性 ,  データベース ,  融合タンパク質 ,  クローン ,  系統樹 ,  *ベクター ,  RT-PCR法 ,  SDS-PAGE ,  原核生物
準シソーラス用語： 大腸菌BL21(DE3) ,  NCBI ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Sitophilus zeamais ,  cytochrome C oxidase subunit III ,  RACE technique ,  bioinformatics analysis ,  prokaryotic expression

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  遺伝子の構造と化学  (EC02020U)

タイトルに関連する用語 (4件)： トウモロコシ ,  クローニング ,  発現 ,  分析