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J-GLOBAL ID:201702245900227003   整理番号:17A0394341

ヒトのカルシウム結合蛋白質S100A9遺伝子発現の精製とそのSH-SY5Y細胞の作用に関する研究【JST・京大機械翻訳】

Human Calcium Binding Protein S100A9 Gene Cloning Expression with Purified and Study the Role of SH-SY5Y Cell
著者 (15件):
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巻: 35  号: 12  ページ: 3260-3267  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2933A  ISSN: 1674-568X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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カルシウム結合蛋白S100A9は多くの慢性疾患において凝集し、いくつかの自己免疫性認知症において重要な役割を果たす可能性がある。多くの報告もS100A9がますます人々の注意を得ていることを示している。組換えヒトS100A9蛋白質を得ることによって,神経芽腫細胞SH-SY5Yに及ぼすそれらの効果と機構を調査した。ヒトS100A9遺伝子を全遺伝子により合成し,組換えプラスミドPET28A-S100A9を構築し,組換えプラスミドの構築に成功した。18°C,25°C,37°Cでのイソプロピル-Β-D-ガラクトシド(IPTG)の発現を,ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)とWESTERN BLOTTINGによって同定し,結果は,18°Cでの蛋白質が上清中に大量に発現することを示した。37°Cでは封入体が大量に発現した。2種類の組換え蛋白質をニッケルアフィニティークロマトグラフィーにより精製し,蛋白質を透析後低温凍結乾燥により得た。CCK-8法を用いて,神経芽腫細胞SH-SY5Yの増殖と増殖に及ぼすS100A9蛋白質の影響を検出した。結果は,2つの組換え蛋白質がSH-SY5Y細胞の成長を阻害し,0.05MG/MLの濃度では有意な阻害効果があり(P<0.01),それらの間には有意差が全くないことを示した(P<0.01)。AO/EB二重染色とフローサイトメトリーを用いて,S100A9によるSH-SY5Y細胞の増殖阻害機構を検出し,その結果,この蛋白質がSH-SY5Y細胞のアポトーシスを促進することを示した。2つのソース蛋白質の間の比較は,SH-SY5Y細胞に及ぼす2つの蛋白質の間に有意差がないことを示した(P<0.05)。本研究では、S100A9組換えタンパク質の獲得に成功し、2種類のS100A9タンパク質はSH-SY5Y細胞の生物学的効果と一致している。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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蛋白質・ペプチド一般 

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