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J-GLOBAL ID：201702245932529001   整理番号：17A0350756

MEG3レンチウイルスベクターの過剰発現と骨髄細胞株XG-7のアポトーシスへの影響を検討した。【JST・京大機械翻訳】

Construction of Lentiviral Vector Over-Expressing MEG3 and Its Effect on XG-7 Cell Apoptosis

著者 (9件)： Zhang Yikun (Department of Hematology, The 306th Hospital, The Chinese People’s Liberation Army) ,  Wang Hua (Institute of Radiation and Irradiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences) ,  Xiao Fengjun (Institute of Radiation and Irradiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences) ,  Zhang Xiaoyan (Institute of Radiation and Irradiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences) ,  Liu Peilin (Department of Hematology, The 306th Hospital, The Chinese People’s Liberation Army) ,  Shi Quanxing (Department of Hematology, The 306th Hospital, The Chinese People’s Liberation Army) ,  Yin Zhao (Department of Hematology, The 306th Hospital, The Chinese People’s Liberation Army) ,  Lei Yan (Department of Hematology, The 306th Hospital, The Chinese People’s Liberation Army) ,  Wang Lisheng (Institute of Radiation and Irradiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences)
資料名： Zhongguo Shiyan Xieye Xue Zazhi  (Zhongguo Shiyan Xieye Xue Zazhi)
巻： 24  号： 6  ページ： 1793-1800  発行年： 2016年 
JST資料番号： C3086A  ISSN： 1009-2137  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的;本研究の目的は,母系発現ベクター込み3(MEG3)を発現するレンチウイルスベクターを構築し,骨髄細胞のアポトーシスに対するその影響を観察することである。方法;MEG3の完全長を含む組換えプラスミドPCDNA3.0-MEG3を鋳型として、MEG3の全長に対するプライマー(オリゴヌクレオチド断片)を設計し、PCRで増幅し、MEG3の全長を獲得した。サブクローニング-EF1-COPGFPを線形化したレンチウイルス発現ベクターベクター-EF1-COPGFPにクローニングし,二重酵素消化,PCR及び配列決定により同定した。リポソーム-EF1-MEG3-COPGFP組換えプラスミドをリポフェクタミン2000によってHEK293T細胞に形質移入し,GFP発現効率を蛍光顕微鏡とフローサイトメトリーによって検出した。MEG3 MRNA発現レベルは,リアルタイムPCRによって検出した。3つのプラスミドの同時トランスフェクションとPEG精製の方法により、レンチウイルスを獲得し、感染力価を最適化し、骨髄腫細胞系を感染させ、フローサイトメトリーによりMEG3が細胞アポトーシスに与える影響を測定した。【結果】;酵素-EF1-MEG3-COPGFP過剰発現ベクターを,制限酵素消化,PCR,および配列決定によって首尾よく構築した。フローサイトメトリーによって測定したレンチウイルス力価は1.86×108PFU/MLであった。フローサイトメトリー分析とREAL-TIME PCR法により、MEG3は293T細胞と骨髄腫細胞において発現が明らかに上昇したことが確認された。フローサイトメトリー分析により、MEG3の過剰発現は骨髄腫細胞のアポトーシスを誘導することが証明された。結論;MEG3を過剰発現するレンチウイルス過剰発現ベクターベクター-EF1-MEG3-COPGFPを成功裏に構築、作製し、このベクターはMEG3を効率的に過剰発現させ、骨髄腫細胞のアポトーシスを誘導し、MEG3が癌抑制機能を有することを実証した。これらの結果は,MEG3が骨髄腫細胞の生物学的特性と機構を制御するための基礎を提供することを示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 酵素的分解 ,  プラスミド ,  *レンチウイルス ,  *骨髄細胞 ,  オリゴヌクレオチド ,  フローサイトメトリー ,  *ベクター ,  *アポトーシス ,  *レンチ ,  リアルタイムPCR法 ,  トランスフェクション
準シソーラス用語： 293T細胞 ,  骨髄腫細胞 ,  発現ベクター ,  *過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： MEG3 ,  myeloma cell XG-7 ,  cell apoptosis ,  lentiviral vector

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (5件)： レンチウイルスベクター ,  過剰発現 ,  骨髄 ,  細胞株 ,  アポトーシス