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J-GLOBAL ID：201702247570521783   整理番号：17A0830864

酵素的に重合した超長ポリ(チミン)-ホスト蛍光銅ナノ粒子に基づいたデオキシリボヌクレアーゼI活性の無標識高感度分析【Powered by NICT】

Label-free and sensitive assay for deoxyribonuclease I activity based on enzymatically-polymerized superlong poly(thymine)-hosted fluorescent copper nanoparticles

著者 (9件)： Luo Lan (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  Xu Fengzhou (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  Shi Hui (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  He Xiaoxiao (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  Qing Taiping (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  Lei Yanli (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  Tang Jinlu (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  He Dinggeng (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China) ,  Wang Kemin (State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, College of Biology, Hunan University, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecular Engineering of Hunan Province, Changsha 410082, PR China)
資料名： Talanta  (Talanta)
巻： 169  ページ： 57-63  発行年： 2017年 
JST資料番号： E0324A  ISSN： 0039-9140  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： デオキシリボヌクレアーゼI(DNase I)は重要な生理学的指標と診断バイオマーカーであるが,その活性を評価するための従来の方法は時間がかかり,面倒で,通常は放射性。ここでは,DNアーゼIと末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ(TdT)の特殊関数を組み合わせた効果的に,DNアーゼI活性に向けた簡単でグリーンな,費用対効果の高い,無標識及び超高感度分析は,長いポリ(チミン)-銅nanoparticles(ポリT CuNPsをホスト)に基づいて構築した。この戦略では,3′-リン酸化DNAプライマーはTdT重合を阻止するように設計されている。DNアーゼIを添加した後,プライマーは3′-ヒドロキシル化フラグメント,CuNP形成のための長いポリT ssDNAとdTTPプールにおけるTdTによる尾を放出する消化されることができた。蛍光測定およびゲル電気泳動はDNアーゼI分析のためのその可能性を示した。結果はサイズ3~4nmの,TdT-重合化長いポリT(>500mer)によるCuNPsテンプレートは,短い合成時間(<5min),大きなStokesシフト(275nm)と強い赤色蛍光発光のようないくつかの利点を持つことを示した。最適条件下で,DNアーゼIの定量的検出が実現され,0.02と2.0mL(R~2=0.9928)間の良好な線形相関,検出限界は0.02mLを示した。対照として他の六ヌクレアーゼまたは蛋白質を選択することにより,優れた特異性も検証した。戦略を成功裡に標準添加法を用いた希釈血清中のDNアーゼIを検出し,生物学的試料のためのその信頼性と実用性を示唆した。提案した戦略は,関連した分子生物学と疾患研究のための検出プラットホームとして有望である。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： *DNアーゼ ,  生体試料 ,  検出限界 ,  一本鎖DNA ,  *蛍光 ,  *ヌクレアーゼ ,  蛍光測定 ,  *感度解析 ,  最適条件 ,  *重合 ,  バイオマーカー ,  タンパク質 ,  ゲル電気泳動 ,  血清
準シソーラス用語： *無標識 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Deoxyribonuclease I ,  末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ ,  蛍光検出 ,  銅ナノ粒子 ,  無標識

分類 (1件)： 分析機器  (CC02020S)

タイトルに関連する用語 (9件)： 酵素 ,  重合 ,  チミン ,  蛍光 ,  銅ナノ粒子 ,  デオキシリボヌクレアーゼI ,  活性 ,  無標識 ,  感度分析