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J-GLOBAL ID:201702249842429858   整理番号:17A0351473

単一交換原理に基づく地衣類遺伝子ノックアウト方法と応用【JST・京大機械翻訳】

Method and Application of Gene Knockout Based Single Cross in Bacillus licheniformis 20085
著者 (6件):
資料名:
巻: 36  号: 11  ページ: 63-69  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3082A  ISSN: 1671-8135  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的;相同性単一交換原理に基づき,BACILLUS LICHENIFORMISの遺伝子ノックアウトのための方法を構築し,遺伝子ノックアウト効率を改善した。方法;BACILLUS LICHENIFORMIS 20085 エンドヌクレアーゼのエンドヌクレアーゼ遺伝子をCELB に にのゲノムDNAから増幅し,重遺伝子の約500BPフラグメントをクロラムフェニコール耐性遺伝子(CMR)と結合した。末端単Mei切后電によりB.LICHENIFORMIS 20085コンピテント細胞に形質転換し,一次ホモ交換のみにより,抵抗性遺伝子遺伝子をCELB遺伝子内部に挿入し,目的遺伝子のノックアウトを達成した。【結果】;クロラムフェニコール遺伝子の欠失株株 20085ΔCELBを,クロラムフェニコール耐性スクリーニングとゲノムPCRによって同定した。発酵試験の結果は,B.LICHENIFORMIS 20085ΔΔの生分解能力が初期の菌株のそれより有意に低く,60時間の発酵後に,1.86U/MLから0.50U/MLまで減少したことを示した。これらの結果は,CELB遺伝子がBACILLUS LICHENIFORMISのセルロース分解に重要な役割を果たすことを示した。結論;重複PCR技術と同源の単一交換原理を結合することにより、BACILLUS LICHENIFORMISの目的遺伝子の快速ノックアウトを実現でき、この菌株はその他の微生物に遺伝子機能の快速鑑定の手段を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子操作  ,  分子遺伝学一般 
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