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J-GLOBAL ID：201702252801131803   整理番号：17A0077910

ハンタウイルス 0303株のS遺伝子のクローニング、発現及び核タンパクの免疫原性の分析【JST・京大機械翻訳】

Cloning and expression of hantavirus nucleoprotein gene of Hunan03 and its immunogenicity

著者 (9件)： Cai Liang (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province) ,  Zhang Hong (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province) ,  Gao Lidong (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province) ,  Liu Jiangao (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province) ,  Qin Di (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province) ,  He Fangling (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province) ,  Liu Jiahui (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province) ,  Zou Yizhou (School of Basic Medical Science,Central South University) ,  Li Junhua (Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province)
資料名： Zhongguo Renshougonghuanbing Xuebao  (Zhongguo Renshougonghuanbing Xuebao)
巻： 32  号： 8  ページ： 711-716  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2253A  ISSN： 1002-2694  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】ハンタウイルス 0303の核蛋白質の原核生物発現ベクターを構築し,大腸菌における核蛋白質発現を研究し,核蛋白質の免疫性と免疫反応性を研究する。方法:特異的拡増漢坦 ウイルス03株のS遺伝子の完全オープンリーディングフレーム(ORF)のプライマーを設計し、RT-PCRにより増幅し、産物をPGM-Tベクターにクローニングし、メチレンブルーのスクリーニング、制限酵素消化、PCRにより同定した。PGEX-6P-2原核生物発現ベクターにクローニングし、ECOLI.BL21 STARTM(DE3)に転化し、IPTGで誘導し、SDS-PAGE、WESTERN BLOTで組換えタンパク質を同定した。GLUTATHIONE SEPHAROSE 4Bを用いて精製組換えタンパク質を精製し、ニュージーランドウサギを免疫し、間接ELISA法を用いて核タンパク質の免疫原性と免疫反応性を評価した。【結果】S遺伝子のORF領域は約PCRBPであり,組換えベクターPGEX-6P-2-Sは制限酵素消化,PCR,および配列決定によって首尾よく構築された。37°C,IPTG濃度0.8MMOL/Lで5時間誘導すると,最高相対分子量約74KDAのGST-NP融合蛋白質が発現した。間接ELISA法により,GST-NP融合蛋白質を免疫化したニュージーランドウサギの血清を検出し,IGM抗体の力価は1:8000に達し,IGG抗体の力価は1:16000に達した。結論:高効率で発現するハンタウイルスS遺伝子組換え発現ベクターを構築し、純度が比較的高い免疫原性と免疫反応性を有する核タンパク質を獲得し、後続のハンタウイルス単クローン抗体の調製に基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *免疫原性 ,  分子量 ,  DNA制限酵素 ,  モノクローナル抗体 ,  融合タンパク質 ,  RT-PCR法 ,  原核生物 ,  *タンパク質 ,  ベクター ,  *ハンタウイルス ,  ELISA
準シソーラス用語： 蛋白質発現 ,  発現ベクター ,  *クローニング ,  *S遺伝子 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： hantavirus ,  nucleoprotein gene ,  prokaryotic expression ,  Nucleoprotein immunogeicity

分類 (5件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  酵素生理  (EH02020J) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (8件)： ハンタウイルス ,  S遺伝子 ,  クローニング ,  発現 ,  核 ,  タンパク ,  免疫原性 ,  分析