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J-GLOBAL ID：201702254864725061   整理番号：17A0078187

新しいGH5ファミリーΒ-マンナナーゼの遺伝子マイニングと発現同定【JST・京大機械翻訳】

Gene Mining, Expression and Characterization of Novel GH5 Family β-Mannanases

著者 (9件)： Tang Cunduo (Henan Provincial Engineering Laboratory of Insect Bio-reactor, Nanyang Normal University) ,  Shi Hongling (Henan Provincial Engineering Laboratory of Insect Bio-reactor, Nanyang Normal University) ,  Yu Xiaohua (School of Life Science and Technology, Nanyang Normal University) ,  Zhang Mei (Penglai Market Supervisory Authority) ,  Tang Qinghai (Henan Provincial Engineering Laboratory of Insect Bio-reactor, Nanyang Normal University) ,  Yue Chao (Henan Provincial Engineering Laboratory of Insect Bio-reactor, Nanyang Normal University) ,  Yao Lunguang (Henan Provincial Engineering Laboratory of Insect Bio-reactor, Nanyang Normal University) ,  Xia Min (School of Life Science and Technology, Nanyang Normal University) ,  Kan Yunchao (Henan Provincial Engineering Laboratory of Insect Bio-reactor, Nanyang Normal University)
資料名： Shipin Kexue  (Shipin Kexue)
巻： 37  号： 11  ページ： 90-96  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2151A  ISSN： 1002-6630  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： Β-マンナナーゼの優れた性能を得るために,2つの新しいGH5ファミリーΒ-マンナナーゼ遺伝子を,ASPERGILLUS ORYZAE RIB40のゲノムからマイニングした。それぞれ5AとAOMAN5Bと命名した。これら2つの配列についての生物情報学的分析を行い、同時にPPIC9K~Mプラスミドを用いて2つの酵素の成熟ペプチドコード遺伝子をPICHIA PASTORIS GS115に発現させ、発現産物を精製し、同定した。バイオインフォマティクス解析の結果,AOMAN5Aは20アミノ酸残基のシグナルペプチドを含み,AOMAN5Bは21アミノ酸残基のシグナルペプチドと12アミノ酸残基のペプチドを含むことを示した。配列アラインメントの結果により、2つの酵素は現在報告されている配列と最も高い相同性がそれぞれ68%と79%であり、しかもAOMAN5AのN末端には1つの1ファミリーのCBMがあることが示された。三次元構造予測の結果,両者は(Α/Β)8のTIM-たる構造に一致することが示された。結果は,REAOMAN5AとREAOMAN5B上清の酵素活性が,同じ発現条件の下で,それぞれ2.9,12.5IU/MLであることを示した。精製後,それらの酵素活性はそれぞれ8.3,104.2MG/MGであり,前者の最適温度は35°Cであったが,後者の最適温度は50°Cであり,PH値は値特性であった。硫酸5AとREAOMAN5Bの糖含有量は,それぞれ,25.4%と12.6%であり,これらの2つの組換えおいてがグリコシル化によって修飾されることを示した。本研究では、2種類の新しいΒ-マンナナーゼを得て、それらの配列特徴を比較分析し、それらの異種発現を実現し、Β-マンナナーゼの更なる研究及び応用に強固な基礎を提供し、その他の新型酵素の遺伝子マイニングに参考となる経験を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 相同性 ,  シグナルペプチド ,  *β-マンノシダーゼ ,  プラスミド ,  ペプチド ,  *遺伝子 ,  酵素 ,  グリコシル化 ,  ゲノム ,  酵素活性度 ,  アミノ酸残基
準シソーラス用語： 異種発現 ,  最適温度 ,  三次元構造 ,  バイオインフォマティクス , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： β-mannanase ,  genome mining ,  bioinformatic analysis ,  Aspergillus oryzae ,  protein expression

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (5件)： ファミリー ,  マンナナーゼ ,  遺伝子 ,  発現 ,  同定