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J-GLOBAL ID:201702258456067372   整理番号:17A0270344

メタゲノムライブラリーの配列-および機能-ベースのスクリーニングを用いた炭化水素汚染した沈殿物における新規トルエンモノオキシゲナーゼ遺伝子の特定

Identification of novel toluene monooxygenase genes in a hydrocarbon-polluted sediment using sequence- and function-based screening of metagenomic libraries
著者 (7件):
資料名:
巻: 101  号:ページ: 797-808  発行年: 2017年01月 
JST資料番号: H0764A  ISSN: 0175-7598  CODEN: EJABDD  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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メタゲノムライブラリーベースのアプローチを用いて,沈殿物内のトルエン分解に寄与する微生物および遺伝子の特定を試みた。トルエンで汚染された沈殿物から高分子量DNAを抽出および精製し,それらをBACベクターに導入後,Escherichia coliに形質転換した。このライブラリーに対して,トルエン4-モノオキシゲナーゼ遺伝子のαサブユニット(tmoA)配列を用いた,ハイブリダイゼーションに基づくスクリーニングを実施した。14個のクローンを得たが,そのうち13個が既知tmoA遺伝子であり,Acinetobacter種由来のtmoA遺伝子が多かった。さらに,BACライブラリーをCupriavidus metalliduransあるいはEdaphobacter aggregansに形質転換し,トルエン分解能に関するスクリーニングも行うことで,IncP1プラスミド上に存在する新規トルエンモノオキシゲナーゼをコードしたオペロンも特定できた。これらの知見はトルエンの分解に寄与する微生物の特定とともに,トルエン分解能の伝播機構の解明にも役立つ。
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