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J-GLOBAL ID:201702265465355446   整理番号:17A0109811

ナンキンマメΒ-1,3-グルカナーゼ遺伝子プロモーターの欠失の解析【JST・京大機械翻訳】

Deletion Analysis on The Peanut (Arachis hypogaea) Promoter of β-1, 3- glucanase Function Region
著者 (8件):
資料名:
巻: 24  号:ページ: 837-846  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2715A  ISSN: 1674-7968  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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ナンキンマメΒ-1,3-グルカナーゼ遺伝子プロモーター(ARACHIS HYPOGAEA PROMOTER OF Β-1,3-GLUCANASE,AH-GLU-PRO)は誘導型のプロモーターに属する。このプロモーター配列における外源信号の分子応答に対する重要なシス調節要素を分析する。長さ970BPのAH-GLU-PRO配列を,インターレース熱非対称PCR(THERMAL)によって増幅した。PLACEとPLANTCAREのオンライン予測結果により、このプロモーター配列には病原菌及びサリチル酸(SALICYLIC ACID,SA)応答に対するシス調節要素が含まれていることが分かった。例えば、GRWAAW、GT1-MOTIF、W-BOX、RAV1AAT、,、 1とBIHD1OSである。予測結果に基づき,5つの正のプライマー(GLU-F,GLU-P_4,GLU-P_3,GLU-P_2およびGLU-P_1,3’)を設計した。5つのプライマー対により,AH-GLU-Pおよび5’末端における4つの欠失フラグメントAH-GLU-P_4AH-GLU-P_1を増幅し,長さはそれぞれ931および217BPであった。これらの5つのフラグメントをそれぞれPCAMBIA1301-XYLAベクターにクローン化した。キシロース遺伝子(( ISOMERASE GENE, XYLA)を安全スクリーニングマーカーとし、Β-グルコシダーゼ遺伝子(Β-グルクロニダーゼ GENE,GUS)をレポーター遺伝子とする5つの植物発現ベクターPCAMBIA130- -GLU-P-PCAMBIA130-XYLA-GLU-P1を構築した。これらの5つの発現ベクターをタマネギ(ALLIUM CEPA)表皮細胞に形質転換し,GUS蛋白質の組織化学的染色とGUS活性を測定し,SAにより誘導した。AH-GLU-PAH-GLU-P_3の3つのベクターによって処理したタマネギ表皮細胞におけるGUS活性は,それぞれ1.45,2.16,1.27倍増加した。AH-GLU-P_2AH-GLU-P_1ベクターに導入したタマネギ表皮細胞は,SA誘導前後のGUS活性に有意差がなかった。ソフトウェア予測の結果により、プロモーターAH-GLU-P、AH-GLU-P_4とAH-GLU-P_3内部に存在するRAV1AAT、MYBCOREATCYCB1とINRNTPSADBはSA応答に対する正の調節要素であることが推測された。AH-GLU-PAH-GLU-P_4の間に存在するGT1-MOTIFとAMMORESIVDCRNIA1はSA応答に対する負の調節要素である。これらの重要なシス調節要素の機能の更なる確認は、落花生の内因性Β-1の調節を実現することである。3-グルカナーゼ遺伝子の効率的な発現、落花生(ARACHIS HYPOGAEA)の耐病性の向上、落花生の遺伝転化過程における特異的発現プロモーターの有効利用に理論的根拠を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子の構造と化学 
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