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J-GLOBAL ID:201702265858326091   整理番号:17A0376834

UHPLC-MS/MSと組み合わせたオフカラムプロカインアミドゲル分離法を用いた血しょう中のブチリルコリンエステラーゼ,その高齢メチルホスホン酸付加物およびブチリルコリンエステラーゼに対するソマンとVX付加物の同時定量【Powered by NICT】

Simultaneous quantification of soman and VX adducts to butyrylcholinesterase, their aged methylphosphonic acid adduct and butyrylcholinesterase in plasma using an off-column procainamide-gel separation method combined with UHPLC-MS/MS
著者 (13件):
資料名:
巻: 1036-1037  ページ: 57-65  発行年: 2016年 
JST資料番号: W0571A  ISSN: 1570-0232  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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OPNAに曝露された血しょう中のブチリルコリンエステラーゼ(BChE),高齢者メチルホスホン酸(MeP)付加物とunadducted BChEに対する有機りん系神経剤(上記単量体)ソマン(GD),VX付加物の同時定量のための新規高感度非アイソトープ希釈法を述べた。OPNA BChE付加物はプラズマからのオフカラムプロカインアミドゲル分離(PGS)で単離された,特異的付加FGES~*AGAASノナペプチド(NP)バイオマーカーにペプシンで消化した。得られたNPは,UHPLC-MS/MS MRMによる検出された。オフカラムPGS法は,それぞれのプラズマ材料からBChE,MeP BChE,VX BChEとGD BChEの90%以上を得ることができる。一GlyとAla変異を持つ一つの新たに設計し,容易に合成されたりん酸化BChEノナペプチドは,伝統的な同位体標識BChEノナペプチドの内部標準として役立つことを報告することに成功した。検量線の直線範囲は200ngmL~( 1)からBChE NP(R~2≧0.990)のためのGD NPとMeP NP(R~2≧0.995),およびpH3.00 200ngmL~( 1)のVX NP,pH2.00 200ngmL~( 1)であった。日間の精度は,相対標準偏差(%RSD)<8.89%であった,正確度は88.9 120%の範囲であった。検出限界は計算したVX NP,GD NP,MeP NPとBChE NPに対して0.411,0.750,0.800と1.43ngmL~( 1)であることであった。OPNA露出品質管理血漿試料を方法検証の一部として特性化した。OPNAに暴露されていない血漿試料の研究はベースライン値またはintereferencesを明らかにしなかった。UHPLC-MS/MSと組み合わせたオフカラムPGS法を用いて,VX NPとGD NP付加物を明確にそれぞれ曝露されたヒト血漿の0.10ngmL~( 1)と0.50ngmL~( 1)における高い信頼性で検出され,わずか0.1mLの血漿試料を必要とする特別な試料調製装置なしで約四時間を要することができる。これらの改善は,簡単,高感度でロバストなPGS UHPLC MS/MS法と,この方法は免疫磁気分離(IMS)法と高い信頼性でOPNAの暴露の遡及的検出のための有用な診断ツールへの魅力的な代替法になるであろう。さらに,開発した方法を用いて,VXとGD曝露(100ngmL~( 1))血漿試料から付加BChEレベルを完全に特性化し,VX GDよりもBChEに対する活性度がより高く,特異的であるという事実は,再確認した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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有機化合物の各種分析  ,  生物薬剤学(基礎) 
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