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J-GLOBAL ID：201702274128347878   整理番号：17A0060167

ミトコンドリア蛍光標識による単一粒子レベルのハイスループット評価法【JST・京大機械翻訳】

High-Throughput Assessment of Mitochondrial Fluorescence Labeling at Single-Particle Level

著者 (6件)： Han Jinyan (Department of Chemical Biology,College of Chemistry and Chemical Engineering,The MOE Key Laboratory of Spectrochemical Analysis & Instrumentation,The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province, Xiamen University) ,  Xu Jingyi (Department of Chemical Biology,College of Chemistry and Chemical Engineering,The MOE Key Laboratory of Spectrochemical Analysis & Instrumentation,The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province, Xiamen University) ,  Zhang Xiang (Department of Chemical Biology,College of Chemistry and Chemical Engineering,The MOE Key Laboratory of Spectrochemical Analysis & Instrumentation,The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province, Xiamen University) ,  Zhou Yingxing (Department of Chemical Biology,College of Chemistry and Chemical Engineering,The MOE Key Laboratory of Spectrochemical Analysis & Instrumentation,The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province, Xiamen University) ,  Chen Chaoxiang (Department of Chemical Biology,College of Chemistry and Chemical Engineering,The MOE Key Laboratory of Spectrochemical Analysis & Instrumentation,The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province, Xiamen University) ,  Yan Xiaomei (Department of Chemical Biology,College of Chemistry and Chemical Engineering,The MOE Key Laboratory of Spectrochemical Analysis & Instrumentation,The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province, Xiamen University)
資料名： Fenxi Huaxue  (Fenxi Huaxue)
巻： 44  号： 8  ページ： 1171-1177  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2394A  ISSN： 0253-3820  CODEN： FHHHDT  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： ミトコンドリアは真核細胞のエネルギー代謝とシグナル伝達の制御中枢であり、各種の敏感、特異的なミトコンドリア蛍光標識技術はすでにミトコンドリアの研究に広く応用されているが、しかし単一ミトコンドリアのレベルの蛍光染色性能の評価方法が不足している。超高感度フローサイトメトリー(HIGH SENSITIVITY FLOW CYTOMETRY,HSFCM)は単一ミトコンドリアに対して高感度、ハイスループット、多パラメータ定量分析の独特な優勢がある。本研究では,単一ミトコンドリアレベルの蛍光標識高スループット評価法を開発した。緑色蛍光蛋白質遺伝子を運ぶPACGFP1-MITOプラスミドをヒト子宮頸癌HELA細胞にトランスフェクトし、G418を用いて安定トランスフェクション細胞を選別し、それぞれ一過性と安定トランスフェクションした細胞からミトコンドリアを抽出した。さらに,プラスミドをトランスフェクトした正常なHELA細胞からミトコンドリアを抽出し,それぞれMITOTRACKER GREEN標識及びスラッジ 62ミトコンドリアDNA染色を行った。実験室で独自に開発した超高感度フローサイトメトリーを用いて,4種類のミトコンドリア標識法の蛍光輝度,標識効率および安定性を評価した。実験結果により、安定トランスフェクション細胞中の単一ミトコンドリアの緑色蛍光タンパク質(GFP)蛍光輝度は瞬間トランスフェクションの17.7倍であり、MITOTRACKER GREEN標識のミトコンドリア輝度より約2桁高く、しかも標記安定性が良好であることが明らかになった。本研究はミトコンドリア標識方法の選択に先進的な分析方法を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 緑色蛍光タンパク質 ,  真核細胞 ,  *蛍光 ,  子宮頚部腫瘍 ,  高感度 ,  輝度 ,  トランスフェクション ,  フローサイトメトリー ,  プラスミド ,  *ミトコンドリア ,  ヒト ,  *蛍光標識
準シソーラス用語： ミトコンドリアDNA ,  蛍光染色 ,  *ハイスループット , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Mitochondria ,  High sensitivity flow cytometry ,  Transient transfection ,  Stable transfection ,  Dye labeling

分類 (2件)： 細胞構成体一般  (EF03010Z) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (5件)： ミトコンドリア ,  蛍光標識 ,  単一粒子 ,  ハイスループット ,  評価法