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J-GLOBAL ID:201702274671027507   整理番号:17A0348928

ヒト臍帯間葉系幹細胞(エキソソーム)が,網膜色素上皮細胞の血管内皮増殖因子A発現に及ぼす影響を検討した。【JST・京大機械翻訳】

Effect of exosomes derived from human umbilical cord mesenchymal stem cells on the expression of vascular endothelial growth factor A in blue light injured human retinal pigment epithelial cells
著者 (8件):
資料名:
巻: 32  号:ページ: 605-610  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2304A  ISSN: 1005-1015  CODEN: ZYAZEE  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】青色光損傷後の網膜色素上皮(RPE)の血管内皮増殖因子A(VEGF-A)の発現に及ぼすヒト臍帯間葉系幹細胞(HUCMSC)の影響を研究する。方法:HUCMSCを培養し、上清を収集し、勾配超遠心分離法によりエキソソームを分離精製した。透過型電子顕微鏡を用いて,エキソソームの形態を観察した。ウエスタンブロット法を用いて,CD63とCD90の発現を検出した。ヒトRPE細胞を,正常対照群,,群およびHUCMSC群にランダムに分割した。光損傷組(と)とHUCMSC(外)は,12時間の青色光照射(2000±500)によって誘発されたRPE細胞の光損傷モデルを確立するために使用された。細胞外培養液に25,50,75ΜG/MLのHUCMSCをそれぞれ添加し,低濃度,中濃度,高濃度の3つの亜群に分けた。各濃度の亜群は8、16、24時間培養し、培養を終了した。RPE細胞におけるVEGF-A蛋白質発現をウエスタンブロット法および免疫蛍光法によって検出し,RPE細胞におけるVEGF-A MRNA発現をリアルタイムRT-PCRによって検出した。結果:透過型電子顕微鏡の観察によると、HUCMSCの外膜は円形或いは楕円形の膜状の小胞で、直径は50~100 NMである。ウエスタンブロットの結果は,HUCMSCの特異的標識蛋白質CD63とHUCMSCの表面蛋白質CD90が,HUCMSCによって発現することを示した。ウエスタンブロットとRT-PCRの結果は,RPE群のRPE細胞におけるVEGF-A蛋白質とMRNAの発現が正常対照群のそれらより有意に増加することを示した(T=-16.553,-19.456,P<0.05)。RPE細胞を8,16,24時間培養したRPE細胞において,低濃度,中濃度,高濃度のRPE細胞は,RPE細胞と比較して,VEGF-A蛋白質とMRNA発現を減少させ,有意差があった(P<0.05)。【結果】RPE細胞におけるVEGF-A蛋白質およびMRNAのダウンレギュレーションは,HUCMSCの作用時間の延長および作用濃度の増加とともに増加した(P<0.05)。免疫蛍光検査の結果により、同じ作用時間はHUCMSCの外因性作用濃度の上昇に伴い、VEGF-Aタンパクの発現が低下することが分かった。【結語】HUCMSCは,RPE細胞のVEGF-A発現を効果的に減少させることができ,その効果はHUCMSCの濃度と時間と正の相関がある。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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