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J-GLOBAL ID:201702275437491939   整理番号:17A0391530

原核生物発現ベクターPET30A/ATRX-C_(2193-2492)の構築と誘導発現【JST・京大機械翻訳】

Construction and inducible expression of prokaryotic expression vector pET30a/ATRX - C_(2193-2492)
著者 (7件):
資料名:
巻: 26  号:ページ: 516-520  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2985A  ISSN: 1004-311X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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[目的]本研究の目的は,ラットのATRX抗原のアミノ酸配列の原核生物発現ベクターを構築し,HPV16ポリクローナル抗体を調製し,HPV16子宮頚癌におけるATRX蛋白質の役割を調査するための基礎を築くことである。【方法】IF-C_(2193-2492)遺伝子フラグメントを,IF-GFP-ATRXプラスミドを鋳型として用いて,PCRによって増幅し,PET30A(+)ベクターにクローニングし,E.COLI BL21コンピテント細胞に形質転換した。原核生物発現ベクターPET30A/ATRX-C_(2193-2492)を構築し,PCR,制限酵素消化及び配列決定により同定した。組換えプラスミドPET30A/ATRX-C_(2193-2492)をIPTGにより誘導し,NI-NTAアフィニティークロマトグラフィーにより精製し,HIS-ATRX-C_(2193-2492)蛋白質を精製した。[結果]900BPのATRX-C_(2193-2492)遺伝子フラグメントを成功裏に獲得し,原核生物発現ベクターPET30A/ATRX-C_(2193-2492)を構築し,このベクターはEを発現することができた。分子量約34KDAの蛋白質を大腸菌で発現させた。【結論】原核生物発現ベクターPET30A/ -C_(2193-2492)は,34KDAの分子量を有するATRX-C_(2193-2492)蛋白質の発現に成功した。精製蛋白質は,ポリクローナル抗体の調製のための実験的基礎を提供することができた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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