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J-GLOBAL ID:201702276945661177   整理番号:17A0157006

高山 ATCC 32222におけるチトクロームB_5還元酵素Iのクローニング,発現および機能同定【JST・京大機械翻訳】

Expression, purification and characterization of cytochrome b_5 reductase I from Mortierella alpina ATCC 32222
著者 (5件):
資料名:
巻: 43  号: 10  ページ: 2172-2178  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2731A  ISSN: 0253-2654  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】本研究の目的は,油 生物におけるチトクロームB_5レダクターゼIの機能を同定することであった。【方法】本研究では,高山 ATCC 32222の膜におけるチトクロームB_5還元酵素I遺伝子とヒト可溶性チトクロームB_5還元酵素遺伝子配列の比較により,大腸菌における可溶性チトクロームB_5遺伝子の発現を調べた。生成物を,Gu離子親,クロマトグラフィー,イオン交換,および分子排除クロマトグラフィーによって精製した。2,6-二LvDianFenNa(DCIP)を基質として,チトクロームB_5還元酵素IのIN VITRO活性とNADHとNADPHの選好性を測定した。反応系にNADHが存在するとき,チトクロームB_5還元酵素IとチトクロームB_5の間の相互作用を,全波長走査法によって検出した。【結果】高山 ATCC 32222における膜結合チトクロームB_5還元酵素Iは,可溶性発現に成功し,精製後にIN VITROで活性を検出した。NADHを用いたときの酵素活性は564.57Uであり,NADPHを用いた場合は51.97Uであった。NADHの存在下で,チトクロームB_5の還元酵素IはチトクロームB_5を還元し,その吸収ピークは411NMから422NMにシフトし,521NMと554NMで吸光度が増加した。[結論]チトクロームB_5還元酵素I N末端領域の除去はその可溶性を増加させ、タンパク質活性を維持した。高山 ATCCにおけるチトクロームB_5還元酵素I遺伝子はNADH-チトクロームB_5還元酵素であり,IN VITROでチトクロームB_5と相互作用する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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酵素一般 
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