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J-GLOBAL ID：201702280368708740   整理番号：17A0202247

本研究では,抗小反Chu獣蛋白質の単鎖抗体の調製と同定を行った。【JST・京大機械翻訳】

Preparation and characterization of single chain antibody against P protein of peste des petits ruminants virus

著者 (9件)： Jin Hongyan (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Sui Xiukun (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Liu Huan (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Li Wenchao (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Liang Lin (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Zhao Lingna (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Wen Shihui (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Zheney Makay (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture) ,  Li Gang (Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Sciences / Beijing Observation Station for Veterinary Drug and Biotechnology,Ministry of Agriculture)
資料名： Zhongguo Shouyikexue  (Zhongguo Shouyikexue)
巻： 46  号： 10  ページ： 1226-1232  発行年： 2016年 
JST資料番号： C3087A  ISSN： 1673-4696  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究では,マウス 75/7575/1株のP1蛋白質に対するモノクローナル抗体を調製し,それらの単鎖抗体(SCFV)遺伝子を精製し,精製したPPRVとGSTタグを持つ組換えP蛋白質を用いてBALB/Cマウスを免疫化した。PPRV P蛋白質のモノクローナル抗体(MAB)を調製し、抗PPRV Pモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマ細胞からトータルRNAを抽出し、VH遺伝子とVL遺伝子を増幅し、オーバーラップ伸長PCR(SOE-PCR)法を用いて一本鎖抗体全長遺伝子を獲得した。原核生物発現ベクターPET32A(+)にクローニングし,組換えプラスミドPET32A-SCFV-3A6を大腸菌BL21(DE3)に形質転換し,組換え蛋白質発現を誘導した。その結果,4つのハイブリドーマ細胞株(A3A6,1P4,3F8および1P1)を安定的に分泌することができ,MAB3A6に対するウエスタンブロットおよび間接免疫蛍光試験(IFA)を行った。ハイブリドーマ細胞の3A6のSCFV遺伝子の増幅に成功し,SCFV-3A6組換え蛋白質が得られ,そのサイズは47KUであり,組換え蛋白質が強い抗原結合活性を持つことを確認した。上述の研究結果により、本研究は4つの安定した抗PPRV P蛋白を分泌できる単クローン抗体ハイブリドーマ細胞株を獲得し、そしてハイブリドーマ細胞株3A6のSCFV遺伝子を増幅し、原核発現を実現し、PPRの予防と治療の新しい措置の研究に基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 原核生物 ,  遺伝子 ,  ハイブリドーマ ,  *タンパク質 ,  ウェスタンブロット法 ,  形質転換 ,  蛍光抗体法 ,  モノクローナル抗体 ,  組換タンパク質 ,  プラスミド
準シソーラス用語： 細胞株 ,  組換蛋白質発現 ,  大腸菌BL21(DE3) ,  発現ベクター ,  *一本鎖抗体 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： peste des petits ruminants virus ,  P protein ,  single chain variable fragment ,  prokoryotic expression

分類 (3件)： 抗原・抗体・補体一般  (ED04010A) ,  抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  ウイルスの生化学  (EG04030F)

タイトルに関連する用語 (5件)： 研究 ,  蛋白質 ,  単鎖抗体 ,  調製 ,  同定