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J-GLOBAL ID：201702282284286354   整理番号：17A0068492

ELISAによるマスタード誘導によるMGMT-DNA架橋体の検出法を検討した。【JST・京大機械翻訳】

An ELISA-based method to detect MGMT-DNA crosslink induced by nitrogen mustard

著者 (5件)： Yang Huiqiong (Institute of Toxicology,College of Military Preventive Medicine,Third Military Medical University) ,  Cheng Jin (Institute of Toxicology,College of Military Preventive Medicine,Third Military Medical University) ,  Ding Jiaoyan (Institute of Toxicology,College of Military Preventive Medicine,Third Military Medical University) ,  Ye Feng (Institute of Toxicology,College of Military Preventive Medicine,Third Military Medical University) ,  Zou Zhongmin (Institute of Toxicology,College of Military Preventive Medicine,Third Military Medical University)
資料名： Disan Junyi Daxue Xuebao  (Disan Junyi Daxue Xuebao)
巻： 38  号： 18  ページ： 1997-2001  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2217A  ISSN： 1000-5404  CODEN： DYXUE8  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】酵素結合免疫吸着検定法によって,O6-アルキル(O6-METHYLGUANINE-DNA メチルトランスフェラーゼ,MGMT)とDNAの架橋(MGMT-DNA CROSSLINK)を検出する。方法:現在の技術を用いて、M-DPCを抽出し、精製し、M-DPCサンプル中のDSDNA含有量を定量し、DPC中の抗原のELISAプレートへのコーティング能力を最適化するなどのキーポイントをまとめた。異なる濃度のマスタード処理により,気道上皮細胞HBEを処理し,所定の時間で細胞を採取し,細胞核抽出/フラグメンテーション/TRIS飽和フェノール回収法を用いてM-DPC試料を調製した。SYBR GREEN I染色法を用いてM-DPCサンプル中のDSDNAを定量した。M-DPCサンプル中のデオキシリボの分解により,M-DPC試料中の抗原の被覆能力を増強した。最終的に,コーティング後の多孔性検出には通常のELISAを用いた。その結果,高速遠心分離や放射性同位体などはなく,通常の方法で細胞M-DPCを抽出した。SYBR GREENI検出ゲノムDNAの線形範囲は2NGから1.5ΜGであり,抽出したM-DPCに含まれるDSDNAの定量に用いられ,これにより試料量を統一した。M-DPCはELISAにより検出でき,一定の範囲で直線関係があった。M-DPCの含有量は3時間後に有意に増加し,マスタードの投与量に依存した。しかし,24時間のM-DPCの含有量は,著しく減少しなかった。結論:確立したELISAによるM-DPCの検出方法は迅速、経済、高感度、ハイスループットであり、一部のその他の架橋タンパク質の検出にも応用できる。Dan芥染毒によるM-DPC形成には時間と用量効果があった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 最適化 ,  *辛子 ,  高感度 ,  メチルトランスフェラーゼ ,  *DNA【核酸】 ,  多孔性 ,  抗原 ,  高速度 ,  被覆 ,  *ELISA ,  線形性 ,  フラグメンテーション
準シソーラス用語： ハイスループット ,  ゲノムDNA ,  *O(6)-メチルグアニン-DNAメチルトランスフェラーゼ , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： MGMT-DNA crosslinking complex ,  ELISA ,  SYBR Green I ,  nitrogen mustard

分類 (1件)： バイオアッセイ  (EA03060N)

タイトルに関連する用語 (5件)： ELISA ,  マスタード ,  誘導 ,  架橋 ,  検出法