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J-GLOBAL ID:201702284714595588   整理番号:17A0103724

Β_3アドレナリン受容体過剰発現による心筋線維芽細胞モデル法の比較【JST・京大機械翻訳】

Comparison of Two Methods of Building Cardiac Fibroblasts Models With β_3-AR Overexpression
著者 (7件):
資料名:
巻: 19  号: 15  ページ: 1774-1780  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3079A  ISSN: 1007-9572  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:2つの異なる方法でΒ_3アドレナリン受容体(Β_3-AR)過剰発現のSDラット心筋線維芽細胞(CFBS)モデルを構築し、2つの方法の効果を比較し、今後細胞レベルでΒ_3-AR心機能を観察する。特に慢性心不全(CHF)への影響に新たな実験方法を提供する。【方法】2015年3月から6月まで,1~3日の新生児SDラット8匹を選択した。【方法】SDラットのCFBSを分離し,IN VITROで培養し,MOI50,MOI100,MOI200の3群にランダムに分割し,Β_3-AR遺伝子により過剰発現したレンチウイルスベクターを用いてCFBSを感染させた。感染率をフローサイトメトリーで測定し,最適MOIを決定した。SDラットをランダムに4つの群に分割した:正常対照群,10(-6)MOL/L群,10(-5)MOL/L群,10(-4)MOL/L群。異なる濃度のΒ_3-ARアゴニストを用いてCFBSを介入し、WESTERN BLOTTING法を用いてΒ_3-AR発現レベルを測定し、Β_3-ARアゴニストによるCFBSの最適濃度を選別した。結果:一般的な光学顕微鏡下でCFBSを観察し、拍動性がなく、大多数の紡錘状があり、その細胞核は比較的に大きく、細胞質は透明。感染24,48,72,96時間後のCFBSの蛍光状態と蛍光発現を観察し,72時間の感染後に,各MOI群におけるCFBSの成長状態は比較的良く,細胞の大部分は紡錘状であり,細胞核は大きく,肉眼で蛍光発現が最も良かった。MOI100群とMOI200群の感染率はMOI50群より高かった(P<0.05)。MOI200群の感染率はMOI100群より低かった(P<0.05)。10(-6)MOL/L群,10(-5)MOL/L群,10(-4)MOL/L群におけるΒ_3-ARの発現は,正常対照群よりも高かった(P<0.05)。10(-5)MOL/L群のΒ_3-AR発現レベルは10(-6)MOL/L群および10(-4)MOL/L群よりも高かった(P<0.05)。10(-5)MOL/L群およびMOI100群におけるΒ_3-ARの発現レベルは,正常対照群よりも高かった(P<0.05)。MOI100群のΒ_3-AR発現レベルは10(-5)MOL/L群より高かった(P<0.05)。【結論】Β_3-AR過剰発現レンチウイルスベクターベクターとΒ_3-ARアゴニストは,Β_3-ARの過剰発現を誘発することができ,前者の効果は後者より優れている。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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