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J-GLOBAL ID：201702287558708455   整理番号：17A0298333

SURVIVIN SHRNAとAPC断片の二重遺伝子のベクター構築とHT-29細胞の発現【JST・京大機械翻訳】

Construction of survivin shRNA and APC double gene vector and its expression in HT-29 cells

著者 (7件)： Yuan Xixian (Department of Digestive Diseases II,the First Affiliated Hospital of Jiamusi University) ,  Duan Houyu (Clinical Medical College of Jiamusi University) ,  Cao Feng (Department of Radiology,the First Affiliated Hospital of Jiamusi University) ,  Du Jingfeng (Department of Digestive Diseases II,the First Affiliated Hospital of Jiamusi University) ,  Zhu Yanli (Department of Digestive Diseases II,the First Affiliated Hospital of Jiamusi University) ,  Cheng Kai (Department of Digestive Diseases II,the First Affiliated Hospital of Jiamusi University) ,  Yang Yantao (Clinical Medical College of Jiamusi University)
資料名： Yixue Yanjiusheng Xuebao  (Yixue Yanjiusheng Xuebao)
巻： 29  号： 4  ページ： 369-374  発行年： 2016年 
JST資料番号： C3037A  ISSN： 1008-8199  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:APC、SURVIVINの2種類の遺伝子発現異常は結腸癌の発生発展に重要な意義がある。SURVIVIN SHRNA、APC機能フラグメントの二重遺伝子共発現レンチウイルスベクターを構築し、HT-29結腸癌細胞に発現するかどうかを観察し、同時にそれが結腸癌細胞のアポトーシスに影響するかどうかを観察する。方法:3対の相補的SHRNA SHRNA断片を構築し、その中から一つの最適なSHRNASHRNA断片をスクリーニングし、APC機能フラグメント(AA1020-合計)と連結し、二重遺伝子共発現プラスミドベクターを構築した。HT-29細胞を実験群、RAD群、空白群の3群に分け、レンチウイルスはHT-29に対して感染を行った。緑色蛍光の発現を観察し、トランスフェクション細胞に対してISH PCR、WESTERN BLOTを行い、SURVIVIN、APC遺伝子の発現レベルを測定した。カスパーゼ-3活性を検出することによって,アポトーシスを検出した。結果:(1)REAL TIME PCR検査により、SURVIVIN遺伝子に対して最適な干渉効果を発揮する断片はSHRNA3配列であることが示された。2)構築したSHRNAベクターは送序によって検証された後、3対のSHRNA配列は最初に設計された配列と完全に同じである。HT-29細胞において緑色蛍光が観察され、実験群のSURVIVIN相対含有量(31.71±1.49)はRAD群(100±0)、ブランク群(95.12±2.15)より明らかに減少した(P<0.05)。APC MRNA発現レベルは,RAD群(0±0)およびブランク群(0.51±0.15)より有意に高かった(P<0.05)。実験群のSURVIVINタンパクの相対含有量(0.18±0.01)は空白群(0.24±0.04)、RAD群(0.22±0.03)より明らかに減少した。APC蛋白質の発現レベル(0.147±0.016)は,ブランク群(0.095±0.012)およびRAD群(0.108±0.015)より有意に高かった(P<0.05)。(3)実験群のアポトーシスの相対的比率(0.573±0.050)は,ブランク群(0.390±0.040)およびRAD群(0.407±0.030)より有意に高かった(P<0.05)。【結語】SHRNA-SHRNA-APC二重遺伝子発現ベクターを首尾よく構築し,HT-29大腸癌細胞において発現させることができ,この遺伝子発現ベクターは,このベクターによる遺伝子治療の基礎実験のための材料を提供することができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 結腸腫瘍 ,  *ベクター ,  APC遺伝子 ,  レンチウイルス ,  蛍光 ,  遺伝子発現 ,  遺伝子療法 ,  アポトーシス ,  *遺伝子 ,  トランスフェクション ,  発現ベクター ,  プラスミドベクター ,  レンチウイルスベクター ,  共発現 ,  *HT29細胞 ,  微生物 ,  動物ウイルス ,  分子遺伝現象

著者キーワード (5件)： HT-29 ,  Survivin shRNA ,  APC efficient fragments ,  Double gene ,  Lentiviral vectors

分類 (2件)： 腫ようの化学・生化学・病理学  (GE02030N) ,  酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (8件)： shRNA ,  APC ,  断片 ,  遺伝子 ,  ベクター ,  構築 ,  HT-29細胞 ,  発現