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J-GLOBAL ID：201702288559077321   整理番号：17A0266794

草-TRNA合成酵素のクローニングと発現【JST・京大機械翻訳】

Cloning and Expression of Leucyl-tRNA Synthetase from Mycobacterium phlei

著者 (4件)： Zhang Rui (Faculty of Functional Food and Wine, Shenyang Pharmaceutical University) ,  Chen Yu (School of Life Science and Biopharmaceutics, Shenyang Pharmaceutical University) ,  Liu Huasong (School of Life Science and Biopharmaceutics, Shenyang Pharmaceutical University) ,  Xu Wei (Faculty of Functional Food and Wine, Shenyang Pharmaceutical University)
資料名： Zhongguo Yiyao Gongye Zazhi  (Zhongguo Yiyao Gongye Zazhi)
巻： 47  号： 11  ページ： 1374-1378  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2238A  ISSN： 1001-8255  CODEN： ZYGZEA  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： PCR法を用いて,MYCOBACTERIUM 草のゲノムから拡増出亮-TRNA合成酵素遺伝子遺伝子 RSを増幅し,PMD19-T SIMPLEクローニングベクターとPET28A(+)発現ベクターにクローニングした。大腸菌(ESCHERICHIA COLI)BL21(DE3)に発現させた。発現産物をNI(2+)キレート化HISTRAP(TM)HPアフィニティークロマトグラフィーで精製し,精製蛋白質の酵素活性を測定した。結果により、PCR増幅により2.8KBのDNA断片が得られ、組換えプラスミドPET28A(+)-LEU RS酵素の同定と配列分析により、構築が正しいことを示した。SDS-PAGEは,標的蛋白質の相対的分子量が約1.10×105であることを示し,蛋白質の発現は32.8%であり,精製蛋白質の純度は93.8%であり,酵素活性は13.2U/MLであった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： キレート化 ,  DNA【核酸】 ,  SDS-PAGE ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  PCR法 ,  プラスミド ,  タンパク質 ,  ゲノム ,  *酵素 ,  *合成酵素 ,  酵素活性度
準シソーラス用語： 配列解析 ,  発現ベクター ,  合成酵素遺伝子 ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： leucyl-tRNA synthetase ,  Mycobacterium phlei ,  expression ,  purification

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (4件)： 草 ,  合成酵素 ,  クローニング ,  発現