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J-GLOBAL ID：201702294242353972   整理番号：17A0108530

ブタ連鎖球菌2型バクテリオファージ分解A5の鍵アミノ酸部位の同定【JST・京大機械翻訳】

Identification of the key amino acid sites in the domain A5 of lysin encoded by phage infecting Streptococcus suis 2

著者 (6件)： Sun Liang (School of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University; Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology) ,  Ji Wenhui (Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiao Tong University) ,  Fu Qiang (Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiao Tong University) ,  Yan Yaxian (Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiao Tong University) ,  Zeng Qiaoying (School of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University) ,  Sun Jianhe (Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiao Tong University)
資料名： Zhongguo Shouyikexue  (Zhongguo Shouyikexue)
巻： 46  号： 8  ページ： 1020-1024  発行年： 2016年 
JST資料番号： C3087A  ISSN： 1673-4696  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究では,STREPTOCOCCUS SUIS 2(ファージ SUIS 2)ファージ(触媒)の触媒ドメインA5の重要なアミノ酸部位を同定するために,NCBI,PFAMおよびUNIPORTデータベースを利用した。触媒領域A5のアミノ酸配列中の各点の保守性について比較分析を行った。ファージのSMP遺伝子をテンプレートとし、PCRによりLYACC遺伝子を増幅し、配列分析を行った後、原核発現プラスミドプラスミド2-LYACCを構築した。プラスミドPSJ2-LYACCを鋳型として用いた。A5の3つの高度に保存されたアミノ酸部位(30のアスパラギン酸/D30,53番目のトレオニン/T53と95番目のグリシン/G95)のコドンを,PCRによって増幅した。突然変異体プラスミドPSJ2-LYACC/D30A,PSJ2-LYACC/T53AおよびPSJ2-LYACC/G95Aを,配列決定後にBL21(DE3)コンピテント細胞に形質転換した。同時にプラスミドプラスミド2-LYACCを対照として平行に形質転換し、IPTGにより27°Cで誘導発現し、菌体重懸後に超音波分解を行い、上清を濾過し、得られたタンパク質抽出物をSDS-PAGEにより分析した。これらの結果は,組換え分解分解とその突然変異体D30A,T53AとG95Aの分子量が約30KUであることを示した。組換え分解分解とその突然変異体D30A、T53AとG95Aのタンパク質抽出物を平板分解試験に用い、結果により、原核発現の組換えLYACCの直径は2.2CMであることが分かった。突然変異体G95Aの裂菌圈の直径は1.4CMであり、られたの活性部分は低下した。突然変異体D30AとT53Aの裂菌圈は消失し,られた活性を完全に失った。これらの結果は,D30とT53がLYACCの鍵アミノ酸であることを示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 体重 ,  分子量 ,  コドン ,  データベース ,  *アミノ酸 ,  形質転換 ,  アミノ酸配列 ,  *連鎖球菌属 ,  SDS-PAGE ,  プラスミド
準シソーラス用語： 蛋白質抽出 ,  配列解析 ,  比較分析 ,  NCBI ,  触媒ドメイン , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Streptococcus suis 2 ,  Lysin ,  bacteriolytic activity ,  key amino acid site

分類 (2件)： ウイルスの生化学  (EG04030F) ,  遺伝子の構造と化学  (EC02020U)

タイトルに関連する用語 (7件)： ブタ ,  連鎖球菌 ,  バクテリオファージ ,  分解 ,  鍵 ,  アミノ酸 ,  同定