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J-GLOBAL ID:201602254152513844   整理番号:16A0787608

TH細胞エピトープの合成PCV2 ORF2CAPに多いペプチド抗原の発現及び免疫原性の分析を含む【JST・京大機械翻訳】

Expression and Immunogenicity Analysis of PCV2 Cap Recombinant Protein Antigen which Contains Helper T cell Epitope Peptides
著者 (7件):
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巻: 46  号: 12  ページ: 2273-2281  発行年: 2015年 
JST資料番号: C2231A  ISSN: 0366-6964  CODEN: CMHPAI  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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擬PCV2 ORF2CAP P1ポリペプチド抗原においてその免疫原性を促進する中のPCV2 ORF1、ORF3からスクリーニングしたTH細胞のペプチド作用を添加し,測定した。および合成発現のPCV2 ORF2CAP P1ポリペプチド抗原はワクチン抗原の実現可能性とした。1つの主新しいTH細胞泛宿ミモトープペプチドと3つのPCV2特異的TH細胞の抗原エピトープを含むペプチド配列を,バイオインフォマティクスと分子生物学的方法を用いて,PCRスクリーニングによって得た。次に,この4つのTH細胞と自己ORF2CAP1上の1つのB細胞エピトープ配列をタンデムに組合せを行ったペプチドスクリーニングをペプチドアミノ酸配列,コドン最適化,切断点への挿入、終止コドン,次に暗号子適応指数と分布周波数解析を行った効率的発現後再化学合成を行うことが実現できると予測した。合成ポリペプチド抗原P1はPET-30A発現ベクターに挿入した,そして変換するBL21(DE3)PLYSSコンピテント細胞の中から,発現工程菌BL21(DE3)PLYSS-PET-30A-P1を構築した。IPTG誘導発現を経た後P1は,高効率の発現をSDS-PAGEで同定された発現は,WESTERN BLOTの同定をその生物活性を実現でき,次にそれぞれを免疫マウスとブタを,マウスの免疫後の抗体レベルがP1および猪免疫後合成ポリペプチド抗原末梢血リンパ細胞の刺激増殖状況をを測定した。その結果,合成発現設計のPCV2P1ポリペプチドの抗原配列は,コドン適応指数は0.89であったが,高レベルの発現を実現することができる,目的DNAフラグメントのサイズは,およそ28.29KUであった,良好な免疫原性を有する。MTT試験の結果,P1ペプチドは抗原免疫後生体内IFN-ΓとIL-4の発現量は有意に増加し,しかも対照群との差異は顕著だった(P<0.05)。この機体の細胞免疫と体液免疫反応を生じるがP1により誘導されることを説明し,そのワクチンとして抗原の更なる研究を用いて理論的基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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分子・遺伝情報処理 

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