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J-GLOBAL ID:201602272344599683   整理番号:16A0892522

マウスのインターロイキンIL-35遺伝子レンチウイルス発現ベクターの構築及び同定。【JST・京大機械翻訳】

Construction and identification of lentivirus vector expressing the mouse IL -35 gene
著者 (6件):
資料名:
巻: 26  号:ページ: 6-11  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2985A  ISSN: 1004-311X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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[目的]小マウス白血球細胞を構築してインターロイキンIL そして-35遺伝子のレンチウイルス発現ベクターを同定。[方法]PCRによりマウスIL-35遺伝子フラグメント法拡増出,それとXHO IとXBAを経てI消化のレンチウイルスベクターPLVX-IRES-ZSGREEN1接続を,構築されたレンチウイルス組換えプラスミドPLVX 35 -IRES-ZSGREEN1-IL-。エンドトキシンキット無しで組換えプラスミドを抽出した後,そのウイルスパッケージに必要な3つのヘルパープラスミドで共トランスフェクションしたShen胚(HEK) 293T細胞におけるエネルギー発現IL-35のレンチウイルス粒子を包装から人,。このウイルスの培養上清濃縮後,勾配希釈法によりその力価を測定した。濃縮後のウイルス感染はHEK293T細胞を用いて,蛍光蛋白質を蛍光顕微鏡により観察した次にの発現そして結合RT-PCR法で検出したIL-35遺伝子はこの細胞中の発現。[結果]IL-35レンチウイルス発現ベクターの構築に成功し,包装のレンチウイルスの力価は1×109 TU/ML,蛍光顕微鏡とRT-PCR検出によってIL-35HEK293T細胞における発現を見出した。[結論]IL-35レンチウイルス発現ベクターを成功裏に構築しそしてIL35蛋白質-エネルギーはHEK293T細胞において過剰発現した。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子操作  ,  ウイルスの生化学 

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