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J-GLOBAL ID:201602286982015680   整理番号:16A0853348

検出は細胞内リン酸化蛋白質のH2AX発現群遺伝毒物のスクリーニングに初代肝細胞モデルを利用し,この方法を検証した【JST・京大機械翻訳】

Method validation of phosphorylated histone H2AX level detection using primary cultured hepatocytes in genotoxic agent screening
著者 (7件):
資料名:
巻: 30  号:ページ: 135-143  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2292A  ISSN: 1000-3002  CODEN: ZYYZEW  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的は,検証した初代マウス肝細胞を試験細胞として,細胞内のリン酸化によってヒストンH2AX(ΓH_2AX)発現変化検出指標の体外検出化学物の遺伝的毒性の実験方法。この方法では,改良二段階コラゲナーゼ・パーフュージョン法を小肝細胞を取得し分離を採用する,そして,肝細胞の培養を用いてIN VITROサンドイッチ外。4つの既知の選択の遺伝的毒物ピンヤンマイシンと、ベンゾピレン、スチレンは酸化スチレンおよび2つの非遺伝的毒物AZAプリンおよびシクロスポリンAではTEST SUBSTANCEとし,被験物質0~40 ΜMOL・L(-1)を用いて初代培養肝細胞を処理し,0~24時間,CCK-8法で細胞毒性を検出し,フローサイトメトリーでΓを用いてH2AXの発現レベル。結果は確立された方法を用い,上記4つの遺伝毒物をスクリーニングし,いずれも陽性結果を得る,2つの非遺伝毒物はいずれも陰性反応を呈した。直接遺伝毒物ピンヤンマイシンとスチレン酸化作用を3時間,間接的遺伝毒物ベンゾピレンとスチレン6HR作用時,ΓH_2AX発現量は最も高かった(P<0.01)。4つの遺伝的毒物処理最適時点(直接遺伝毒物:3H;間接的遺伝毒物的:6 H)と最適作用濃度(10ΜMOL・L(-1))誘発細胞ΓH_2AX群の発現レベルは順に,25.7,18.4であった。12.4と14.2(平均蛍光強度)を,それぞれ溶媒DMSO対照群の18,12,8および10倍(P<0.01),しかもΓH_2AXの発現レベルと遺伝的毒物濃度の有意な正の相関(P<0.01)を呈した。非遺伝的毒物AZAプリンおよびシクロスポリンA処理群とDMSO溶媒ブランク対照群と比較して,ΓH_2AXのレベルにはいずれも有意な変化はなかった。結論では初代肝細胞モデルを利用して検出ΓH_2AX発現レベルはS9のない場合は有効な遺伝毒物と非遺伝毒物をと直接的遺伝毒性と間接的遺伝毒性は区別することができた。ΓH_2AX発現レベルは鑑別,遺伝毒物と非遺伝毒物の有効な参考指標とすることができる。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
細胞分裂・増殖  ,  遺伝子発現 

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