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J-GLOBAL ID:201602287057760900   整理番号:16A1120528

CAS技術は遺伝子ノックアウトを効率的にノックアウトすることができる。【JST・京大機械翻訳】

CRISPR/Cas Techniques Can Knockout the Gene of Chicken Effectively
著者 (12件):
資料名:
巻: 47  号:ページ: 1266-1271  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2231A  ISSN: 0366-6964  CODEN: CMHPAI  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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本研究は、鶏の上で1種の高効率、安定な遺伝子標的の編集技術体系を創立し、目的遺伝子の定点のノックアウトを実現し、後続のニワトリ遺伝子編集のために操作の根拠を提供することを目的とした。NCBIデータベースにより提供されたCDS配列に基づき、C2EIP(CHR2、EXPRESSION IN PGC)遺伝子の全長をクローンし、遺伝子配列中のAPMの位置によって特異的GRNA1、GRNA2とGRNA3を設計した。CAS9/GRNAベクターを構築した。設計したCAS9/ トランスフェクト状態の良いDF-1は,LUCIFERASE SSA組換え検出法,T7E1酵素切断法及びTAクローニング法を用いてDF-1細胞におけるGRNAのノックアウト効率を測定した。LUCIFERASE SSA組換えの検出結果により、CASCAS9/3ベクターは遺伝子ノックアウト活性があり、蛍光活性は対照組より2倍高く、T7E1制限酵素の結果はCASCAS3遺伝子のノックアウト活性が27%であることを示した。TAクローンの配列決定結果により、30個の測序菌液の中に8個の菌液が異なる数の塩基欠失或いは増加を示し、初歩的に遺伝子ノックアウトの効率は26%であることが分かった。本研究では、鶏の中でCAS9媒介の遺伝子ノックアウト技術を初歩的に確立し、この技術は鶏の細胞DF-1に遺伝子ノックアウトを安定させることができる。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
著者キーワード (3件):
分類 (1件):
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遺伝子操作 
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