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J-GLOBAL ID：201702210861968753   整理番号：17A0199385

HISタグの水稻硅輸送蛋白質発現ベクターの構築とPICHIA PASTORISにおける発現【JST・京大機械翻訳】

Construction of eukaryotic expression vector of OsLsi1 with His-tag and its expression in Pichia pastoris

著者 (7件)： Lin Hongmei (College of Life Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fujian Provincial Key Laboratory of Agroecological Processing and Safety Monitoring) ,  Fang Changxun (College of Life Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fujian Provincial Key Laboratory of Agroecological Processing and Safety Monitoring) ,  Lin Ruiyu (College of Life Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fujian Provincial Key Laboratory of Agroecological Processing and Safety Monitoring) ,  He Jianyu (College of Crop Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fujian Provincial Key Laboratory of Agroecological Processing and Safety Monitoring) ,  Lin Weiwei (College of Life Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fujian Provincial Key Laboratory of Agroecological Processing and Safety Monitoring) ,  Li Yingzhe (College of Life Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fujian Provincial Key Laboratory of Agroecological Processing and Safety Monitoring) ,  Lin Wenxiong (College of Life Sciences, Fujian Agriculture and Forestry University, Fujian Provincial Key Laboratory of Agroecological Processing and Safety Monitoring)
資料名： Fujian Nonglin Daxue Xuebao. Ziran Kexue Ban  (Fujian Nonglin Daxue Xuebao. Ziran Kexue Ban)
巻： 45  号： 5  ページ： 561-566  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2897A  ISSN： 1671-5470  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： イネの根系CDNAを鋳型とし、PCRでHISタグを含むLSI1遺伝子のオープンリーディングフレームを増幅し、そして、この遺伝子をPICHIA PASTORIS発現ベクターPPIC9Kにクローニングし、PCRとシークエンシングにより組換えプラスミドPPIC9K-LSI1の遺伝子配列を検証した。組換えプラスミドPPIC9K-LSI1を,SAC I酵素消化によって線形化し,PICHIA PASTORIS GS115コンピテント細胞に形質転換し,メタノール MM板Shaiを用いて,酵母の形質転換を行った。次に,異なるコピー濃度のG418プレートを用いて,多重コピー形質転換株をスクリーニングした。酵母のゲノムを抽出し、PCRで正しい菌株を確認したのは、菌株(GS115/PPIC9K-LSI1)である。72時間の1%メタノールによって誘発された後,上清を採取し,SDS-PAGEによって32.8KDAの標的蛋白質を検出し,それはSI輸送蛋白質(OSLSI1)であった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 酵素的分解 ,  根系 ,  ゲノム ,  プラスミド ,  *形質転換 ,  遺伝子 ,  酵母 ,  SDS-PAGE
準シソーラス用語： 標的蛋白質 ,  菌株 ,  遺伝子配列 ,  クローニング ,  オープンリーディングフレーム ,  *発現ベクター ,  *輸送蛋白質 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Pichia pastoris ,  OsLsi1 ,  pPIC9k ,  heterogenous expression

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  酵素生理  (EG03052C)

タイトルに関連する用語 (8件)： HIS ,  タグ ,  水 ,  輸送蛋白質 ,  発現ベクター ,  構築 ,  Pichia ,  発現