マンソン裂(SMLAP)のバイオインフォマティクス解析,クローニング及び発現【JST・京大機械翻訳】

Yang Zuting; Chen Liqiang; Fu Ruijia; Yin Yiting; Liang Peng; Lv Gang; Liang Pei

文献

J-GLOBAL ID：201702212268287931 整理番号：17A0301634

マンソン裂(SMLAP)のバイオインフォマティクス解析,クローニング及び発現【JST・京大機械翻訳】

Bioinformatic analysis, cloning, and expression of leucine aminopeptidase from Spirometra mansoni

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巻： 11 号： 11 ページ： 1004-1009 発行年： 2016年
JST資料番号： C3057A ISSN： 1673-5234 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

【目的】生物(裂)遺伝子の構造と機能を分析するためにバイオインフォマティクス法を使用して,原核生物発現ベクターにクローン化して,原核生物発現ベクターにクローン化して,それらの機能を研究するための基礎を築く。【方法】生物遺伝子とそのコード化蛋白質の構造,生物学的および免疫学的特性を,バイオインフォマティクスソフトウェアによって分析した。標的遺伝子をPCRにより増幅し,原核生物発現ベクターPGEX-4T1にクローニングし,大腸菌BL21(DE3)に形質転換し,IPTGにより誘導し,発現した組換え蛋白質をGSTタグクロマトグラフィーにより精製した。蛋白質純度は12%SDS-PAGEによって分析した。結果:曼氏迭宮 LAP遺伝子のORF ファインダーは核BPの核酸配列を示し,554アミノ酸をコードし,21アミノ酸の位置にシグナルペプチドが出現することを予測した。シグナルペプチドを除去した後の核酸配列は1BPであり、360アミノ酸をコードし、理論分子質量単位は40KUであり、ヒトLAP遺伝子配列との類似性は38%であった。SMLAPとヒトB細胞エピトープの予測結果を比較すると,類似度は極めて低かった。原核生物発現ベクターPGEX-4T1-SMLAPを大腸菌に形質転換し,IPTGにより誘導し,標的蛋白質は主に封入体の形で存在した。超音波破砕,尿素溶解封入体,透析,GSTカラムクロマトグラフィーにより単一成分の組換蛋白質を得た。結論:構築した原核細胞発現系はSMLAP蛋白質を発現することができる。バイオインフォマティクス分析はSMLAPの潜在的応用価値を有する免疫診断分子であり、主に封入体の形で存在する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

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遺伝子操作 , 蛋白質・ペプチド一般

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