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J-GLOBAL ID：201702213629949246   整理番号：17A0351469

GEOBACILLUS シクロデキストリン1Β-シクロデキストリンの結合部位のN623飽和突然変異が,触媒効率と生成物特異性に及ぼす影響を研究した。【JST・京大機械翻訳】

Saturated Mutation Effects on Catalytic Efficiency and Product Specificity of Starch Binding Site N623 of Cyclodextrin Glucanotransferase from Geobacillus sp.CHB1

著者 (5件)： Guo Yonghua (Soil and Fertilizer Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences) ,  Chen Jichen (Soil and Fertilizer Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences) ,  Cai Haisong (Soil and Fertilizer Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences) ,  Chen Longjun (Soil and Fertilizer Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences) ,  Lin Xinjian (Soil and Fertilizer Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences)
資料名： Zhongguo Shengwu Gongcheng Zazhi  (Zhongguo Shengwu Gongcheng Zazhi)
巻： 36  号： 11  ページ： 30-38  発行年： 2016年 
JST資料番号： C3082A  ISSN： 1671-8135  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： GEOBACILLUS シクロデキストリン1-シクロデキストリン(CGTASE)の触媒効率と生成物特異性を向上させるために,アミノ酸配列とシミュレーション構造を分析した。その結果,澱粉結合部位の2部位のアミノ酸残基の立体配座が,その触媒効率に影響する可能性があることが判明した。オーバーラップPCR技術を用いて、その澱粉結合部位の22遺伝子座位(N623)に突然変異と突然変異を行い、19種類の異なるアミノ酸変異体を構築した。突然変異遺伝子をPET-28A(+)-OMPAベクターに連結し,大腸菌BL21(DE3)に発現させた。可溶性澱粉を基質として酵素触媒実験を行い、HPLCにより反応産物中のシクロデキストリン含有量の変化を分析した。結果は,野生型CGTASEと比較して,突然変異酵素N623Tの触媒効率が明らかに向上し,総環化活性が58.6%増加し,Α-環化活性が64%増加し,Β-環化活性が80.5%増加し,Γ-環化活性が35.3%減少したことを示した。生成物特異性は,野生型CGTASEと比較して,突然変異酵素N623Tの澱粉転化率は11.3%から39.7%に増加し,Α-シクロデキストリンとΓ-シクロデキストリンの比率は32.8%と7.7%に減少した。Β-シクロデキストリンは59.5%まで増加した。可能性のある機構を分析した。野生型CGTASEと比較して,突然変異体N623Tにおけるトレオニン残基はアスパラギンを置換し,澱粉結合部位の二座位の配座変化をもたらし,この立体配座最適化基質作用方向が反応の進行に有利になり,酵素の触媒効率が向上した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： アミノ酸配列 ,  最適化 ,  立体配座 ,  *突然変異 ,  基質 ,  PCR法 ,  *シクロデキストリン ,  澱粉 ,  配座転移 ,  野生型 ,  アミノ酸残基 ,  *結合部位
準シソーラス用語： 変異酵素 ,  *特異性 ,  *触媒効率 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Cyclodextrin glucanotransferase ,  Saturated mutation ,  Catalytic efficiency ,  Product specificity

分類 (5件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  作物の品種改良  (FC02030G) ,  稲作  (FC03020C) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  遺伝的変異  (EC01030Y)

タイトルに関連する用語 (9件)： Geobacillus ,  シクロデキストリン ,  結合部位 ,  飽和 ,  突然変異 ,  触媒効率 ,  生成物 ,  特異性 ,  研究