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J-GLOBAL ID:201702213661204604   整理番号:17A0677725

組換え鶏IGΛ軽細胞の発現とそのモノクローナル抗体の調製と同定を行った。【JST・京大機械翻訳】

Secretable eukaryotic expression of recombinant chicken Igλ and preparation of monoclonal antibodies against chicken Igλ
著者 (7件):
資料名:
巻: 24  号:ページ: 260-262  発行年: 2008年 
JST資料番号: C2523A  ISSN: 1007-8738  CODEN: XFMZFM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的;組換えベクターPCDNA-Λを構築し、COS7細胞に発現させ、鶏IGΛ軽鎖を発現させ、抗鶏IGΛ軽鎖の単クローン抗体(MAB)を作製した。方法;シグナルペプチドを持つ鶏IGΛ軽鎖遺伝子をPCRで増幅し、制限酵素消化により消化し、真核発現ベクターPCDNA3にクローニングし、6×HISタグ、分泌発現を持つ組換えベクターPCDNA-Λを構築した。組換えベクターをCOS7細胞にトランスフェクトした後、SDS-PAGEにより真核発現ベクターPCDNA-ΛがCOS7細胞の分泌発現を分析した。BALB/Cマウスを2×106個のBリンパ球で免疫化し,脾細胞と骨髄腫細胞を融合し,細胞免疫蛍光法と間接ELISA法によりハイブリドーマ細胞クローンをスクリーニングした。【結果】;組換え発現ベクターを構築し,SDS-PAGE分析によりCOS7細胞における清有目蛋白質の分泌発現を確認した。ハイブリドーマのスクリーニングと同定により、2株の抗鶏IGΛ軽鎖MABを分泌するハイブリドーマ細胞株を獲得し、WESTERN BLOTにより、このMABが組換え鶏IGΛ軽鎖に対する反応性を測定した。結論;組換え発現ベクターPCDNA-Λを構築し、COS7細胞上清に分泌させ、組換え鶏IGΛ軽鎖を発現させた。リンパ球ハイブリドーマ技術を用いて,鶏のIGΛ軽鎖をスクリーニングすることに成功した。これらの結果は,鶏IGΛ軽鎖の構造と機能を深く研究するための基礎を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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抗原・抗体・補体の生産と応用 

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