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J-GLOBAL ID:201702213733805015   整理番号:17A0528795

中華9遺伝子のクローニング,配列解析,および原核生物発現を分析した。【JST・京大機械翻訳】

Molecular cloning, sequence analysis and prokaryotic expression of SRP9 gene in the Chinese honeybee, Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae)
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巻: 59  号: 12  ページ: 1332-1339  発行年: 2016年 
JST資料番号: W1455A  ISSN: 0454-6296  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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[目的]本研究の目的は,中華 CERANA CERANA9(SRP9)遺伝子の配列を調べ,精製した組換え蛋白質を得ることである。それは蛋白質の機能を探究するための基礎を築く。【方法】RT-PCR法を用いて,ミツバチのSRP9遺伝子のコード領域を増幅し,ソフトウェアMEGA5.1により系統樹を構築した。蛋白質の構造を,PREDICEPROTEINとSWISS-MODELソフトウェアによって予測した。大腸菌ESCHERICHIA COLI発現システムを用いて原核生物発現を行った。組換蛋白質を尿素溶解法によって精製した。【結果】増幅9遺伝子のコード領域は237BPであり,ACCSRP9と命名した。この遺伝子は78個のアミノ酸をコードし、エンコードタンパクの相対分子量は9.36KD、等電点は9.17である。系統樹解析の結果,ACCSRP9と西洋ミツバチの間のSRP9とマウスミツバチのSRP9は1つの枝であることが示された。蛋白質二次構造予測は,2つのΑ-ヘリックスと3つのΒ--を含むことを示した。ホモロジーモデリングにより蛋白質の三次元構造を得た。ACCSRP9シャトル発現ベクターPGEX-6P-1をBL21(DE3)において原核生物発現させ、その組換えタンパク質を封入体に発現させ、最終的にN末端GSTタグ付き組換えタンパク【結論】本研究では,中華9遺伝子をクローン化し,その配列を分析し,タグを持つ組換え蛋白質を得て,この遺伝子の機能を更に研究するための参考と材料を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子発現 
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