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J-GLOBAL ID：201702214098262911   整理番号：17A0675885

組換えヒトN末端欠失MBLの原核発現とその活性研究【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic expression and biological activities of recombinant human MBL N-terminal deletant (rhMBLΔN)

著者 (5件)： LEI Ming (Department of Immunology;Southern Medical University) ,  ZUO Daming (Department of Immunology;Southern Medical University) ,  WANG Mingyong (Department of Immunology;Southern Medical University) ,  ZHANG Yani (Department of Immunology;Southern Medical University) ,  CHEN Zhengliang (Department of Immunology;Southern Medical University)
資料名： Mianyixue Zazhi  (Mianyixue Zazhi)
巻： 24  号： 3  ページ： 346-349  発行年： 2008年 
JST資料番号： C2408A  ISSN： 1000-8861  CODEN： MIZAED  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】生物学的活性を持つ組換えヒトN末端欠失マンナナーゼ(レクチンΔN)蛋白質を発現させる。【方法】PCR法を用いて,中国の野生型MBL CDNAを含むプラスミドPGEM-MBLからRHMBLΔN遺伝子フラグメントを増幅し,PET43.1Aベクターに挿入した。大腸菌BL21(DE3)に形質転換し,細胞ΔN蛋白質を発現させた。NI(2+)-NTAアガロースカラムを用いて蛋白質を精製し,SDS-PAGE,WESTERN BLOT及びELISAにより同定した。結果:PGEM-MBLから長さ約620BPのDNA断片を増幅し、構築した組換え発現ベクターはBAM HIとECO RIによって制限された後、約7270BPと620BPの断片が出現し、シークエンシングの結果は予想されたものと完全に一致した。発現した組換えタンパク質を精製した後、SDS-PAGEによりMRMRのタンパク質と同定され、精製タンパク質は抗ヒトMBL抗体と結合し、リガンド結合活性を持ち、人と結合したセリンプロテアーゼ1、2のN末端断片と結合することが分かった。結論:RHMBLΔNを発現できる菌株と活性のRHMBΔNタンパク質を獲得し、更なる研究のために条件を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ヒト ,  ベクター ,  レクチン ,  ELISA ,  組換タンパク質 ,  セリンプロテイナーゼ ,  DNA【核酸】 ,  プラスミド ,  生物活性 ,  SDS-PAGE ,  形質転換 ,  PCR法
準シソーラス用語： 発現ベクター ,  大腸菌BL21(DE3) ,  *アミノ末端 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Mannan-binding lectin ,  N-terminal deletant ,  Prokaryotic expression ,  Activities

分類 (3件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  酵素生理  (EG03052C) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

タイトルに関連する用語 (8件)： 組換え ,  ヒト ,  N末端 ,  欠失 ,  MBL ,  発現 ,  活性 ,  研究