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J-GLOBAL ID:201702214514011125   整理番号:17A0175909

ソルビトール遺伝子におけるソルビトール遺伝子の過剰発現【JST・京大機械翻訳】

Clone and overexpression of sorbose dehydrogenase in Ketogulonigenium
著者 (5件):
資料名:
巻: 33  号: 10  ページ: 821-825  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2350A  ISSN: 1006-2858  CODEN: SYDXFF  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】2-ケト-L-酸の産生を向上させるために,KETOGULONICIGENIUM遺伝子をクローン化して過剰発現させる。【方法】ソルビトール遺伝子((,SDH)をKETOGULONICIGENIUM DSMDSMのゲノムからクローン化した。酵素1MCS-2-SDHの組換えプラスミドを構築するために,酵素1-MCS-2プラスミドを,両親1-MCS-2プラスミドに挿入した。PBBR1MCS-2とPBBR1MCS-2-SDHを,それぞれ,ドナー(E.COLI)S17-1に変換した。Tong古竜酸菌(003)RIF-B-003を受容体として両親の本接合転移を行った。挑取利福(RIFAMYCIN,RIF)とカナマイシンダブルプレート上の接合をポリメラーゼ連鎖反応(POLYMERASECHAINREACTION,PCR),二重酵素消化および配列決定により検証した。取重組菌を振盪フラスコによって発酵した。蛋白質のドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SODIUMDODECYLSULFATEPOLYACRYL-AMIDEGELELECTROPHORESIS,SDS-PAGE)を用いて,陽性クローンの過剰発現を確認した。発酵エンドポイント2-ケト-L-酸の収率を測定した。【結果】組換えプラスミドPBBR1MCS-2-SDHを首尾よく構築し,SDS-PAGEによって検出した。発酵したエンドポイントの蛋白質は,58KU(標的蛋白質)の処条において増加し,組換え株の発酵エンドポイントの2-ケト-L-古酸の収率は,対照-003のものより%%高かった。結論:ソルビトール遺伝子は,KETOGULONICIGENIUM-003において過剰発現し,エンドポイント2-ケト-L-酸の収率を増加させることができた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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酵素一般 
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