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J-GLOBAL ID：201702215500729564   整理番号：17A0257086

Β-シクロデキストリンのクローニング,発現,および酵素学的特性を研究した。【JST・京大機械翻訳】

Cloning, expression and characterization of recombinant β-cyclodextrin glucosyltransferase

著者 (3件)： Shen Enhua (College of Life Science, Yangtze University) ,  Li Xiangqian (Faculty of Life Science & Chemical Engineering,Huaiyin Institute of Technology) ,  Wu Huawei (College of Life Science, Yangtze University)
資料名： Shipin yu Fajiao Gongye  (Shipin yu Fajiao Gongye)
巻： 42  号： 11  ページ： 77-81  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2153A  ISSN： 0253-990X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 坎皮納 PAENIBACILLUSからのΒ-シクロデキストリン(Β-シクロデキストリン GLYCOSYLTRANSFERASE)をコードするΒ-シクロデキストリン(取得)を得た。HIS-TAGをシグナルペプチドを除去するCGT遺伝子を発現ベクターPET28A(+)にクローニングした後、大腸菌BL21(DE3)に導入し、発現を誘導した。熱変性とNI-NTAにより組換えΒ-CGTASEを精製し,SDS-PAGEにより検出し,その分子量は約74KDAであり,組換えΒ-CGTASEの酵素的性質を予備的に研究した。結果は以下を示す。組換えΒ-CGTASEの最適PHは7.0であり,PH5.5~10.0の範囲で安定であり,最適反応温度は65°Cであり,組換え酵素は55°Cで5時間保持しても90%以上の活性を維持した。いくつかの金属イオンと化学試薬の組換え酵素に対する影響を研究することにより、Β-CGTASEは1種の金属酵素であり、CA(2+)は酵素の触媒に対して重要な作用を発揮し、特に低濃度では酵素の活性に対して促進作用があることが分かった。組換え酵素の酵素反応速度論は,K_Mが3.75MG/ML,V_(MAX)が0.33MG/(MIN ML)であることを示した。この研究はΒ-CGTASE遺伝子の異種発現の実現に成功し、Β-CGTASEの工業生産と応用のために基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 金属イオン ,  酵素反応速度論 ,  *酵素 ,  シグナルペプチド ,  金属酵素 ,  熱変性 ,  反応温度 ,  SDS-PAGE ,  工業生産 ,  分子量
準シソーラス用語： 異種発現 ,  組換酵素 ,  大腸菌BL21(DE3) ,  発現ベクター ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： β-cyclodextrin glucosyltransferase ,  Paenibacillus campinasensis ,  clone ,  E.coli ,  enzymatic properties

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  酵素生理  (EG03052C)

タイトルに関連する用語 (5件)： シクロデキストリン ,  クローニング ,  発現 ,  酵素学 ,  研究