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J-GLOBAL ID：201702216279894653   整理番号：17A0677721

ヒトGITR_(AA27-165)蛋白質の原核発現とポリクローナル抗体調製【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic expression of human GITR_(aa27-165) and preparation of its polyclonal antibody

著者 (9件)： TONG Jia (Department of Immunology and Laboratory Immunology;School of Medical Technology) ,  WANG Shengjun (Department of Immunology and Laboratory Immunology;School of Medical Technology) ,  CHEN Jun (Department of Immunology and Laboratory Immunology;School of Medical Technology) ,  MAO Chaoming (Department of Immunology and Laboratory Immunology;School of Medical Technology) ,  YANG Yunliang (Department of Ophthalmology;the Affiliated Hospital) ,  YANG Min (Department of Immunology and Laboratory Immunology;School of Medical Technology) ,  HU Zhengjun (Department of Immunology and Laboratory Immunology;School of Medical Technology) ,  ZHI Diyuan (Grade 2004;Laboratory Medicine of Jiangsu University) ,  XU Huaxi (Department of Immunology and Laboratory Immunology;School of Medical Technology)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 24  号： 3  ページ： 243-246  発行年： 2008年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的;人_(AA27-165)融合蛋白質を発現させ,精製し,HGITR_(AA27-165)融合蛋白質のポリクローナル抗体を調製した。方法;PCR_(AA27-165)コード配列をPGEM T-HGITRからPCRにより増幅し,組換えプラスミドPQE30-HGITR_(AA27-165)を構築した。陽性組換えプラスミドを大腸菌に形質転換し,IPTGにより融合蛋白質を誘導し,PROFINITY IMAC NI-CHARGED RESINアフィニティークロマトグラフィーにより精製した。精製タンパク質をニュージーランドウサギに免疫し、ポリクローナル抗体を獲得し、PROTEIN A SEPHAROSEカラムで精製し、ELISA法で抗体価を測定し、WESTERN BLOT法で抗体特異性を測定した。【結果】;PQE30-HGITR_(AA27-165)の原核生物発現ベクターを構築し、原核タンパク質HGITR_(AA27-165)タンパク質を封入体として大腸菌で高レベルの発現を得た。90%以上の純度のHGITR_(AA27-165)蛋白質を精製し,蛋白質濃度が400MG/Lのとき,抗HGITR_(AA27-165)の抗高力価は1に達した。1.6×105、WESTERN BLOTにより、それは良好な特異性を有することが分かった。結論;高純度のHGITR_(AA27-165)蛋白質を得て,特異の生物学的機能の更なる研究のための実験的基礎を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 核タンパク質 ,  形質転換 ,  融合タンパク質 ,  封入体 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  *ヒト ,  原核生物 ,  プラスミド ,  純度 ,  ELISA ,  *タンパク質 ,  大腸菌 ,  抗体価 ,  *ポリクローナル抗体
準シソーラス用語： 特異性 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： human glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor ,  prokaryotic expression ,  polyclonal antibody

分類 (2件)： 抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (5件)： ヒト ,  蛋白質 ,  発現 ,  ポリクローナル抗体 ,  調製