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J-GLOBAL ID：201702217241299910   整理番号：17A0297588

脆弱X精神発達遅滞遺伝子1(FMR1)真核発現ベクターの構築とその応用【JST・京大機械翻訳】

Construction and application of eukaryotic expression vector of fragile X mental retardation 1 (FMR1) gene

著者 (5件)： Yang Wenjing (Dongfang Hospital,Xiamen University,Research Laboratory of Medical Genetics,PLA Institute of Technology for Birth Control,Fetal Health and Child Growth) ,  Fu Xianguo (Dongfang Hospital,Xiamen University,Research Laboratory of Medical Genetics,PLA Institute of Technology for Birth Control,Fetal Health and Child Growth) ,  Liao Juan (Dongfang Hospital,Xiamen University,Research Laboratory of Medical Genetics,PLA Institute of Technology for Birth Control,Fetal Health and Child Growth) ,  Guo Xiaoyan (Dongfang Hospital,Xiamen University,Research Laboratory of Medical Genetics,PLA Institute of Technology for Birth Control,Fetal Health and Child Growth) ,  Lan Fenghua (Dongfang Hospital,Xiamen University,Research Laboratory of Medical Genetics,PLA Institute of Technology for Birth Control,Fetal Health and Child Growth)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 32  号： 11  ページ： 1513-1516  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】ヒトのX-精神遅滞遺伝子1(FMR1)の真核細胞発現ベクターを構築し,FMR1を安定的にトランスフェクトしたHELA細胞系を確立する。方法:PCR法によりヒトのFMR1のCDNAコード領域を増幅し、DNA組換え技術を用いてPEGFP-N2真核細胞発現ベクターに挿入し、組換えプラスミドを制限酵素消化及びDNAシークエンシングにより同定した。組換えプラスミドを,リポソームによってHELA細胞に形質移入し,G418により安定的にトランスフェクトしたHELA細胞系をスクリーニングした。WESTERN BLOT法、免疫蛍光染色とレーザー走査共焦点顕微鏡技術を用いて、FMR(FMRP)のHELA細胞における発現と定位を同定した。結果:二重消化とDNAシークエンシングの結果により、PEGFP-N2-FMR1真核発現プラスミドの構築に成功したことが明らかになった。WESTERN BLOTとレーザー共焦点顕微鏡の結果により、GFP-FMRP融合タンパクはHELA細胞で発現し、主に細胞質に定位することが分かった。【結語】FMR1の安定した形質移入のためのHELA細胞系の構築に成功し,FMRPを発現することができた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 真核細胞 ,  共焦点顕微鏡 ,  プラスミド ,  リポソーム ,  DNA制限酵素 ,  トランスフェクション ,  PCR法 ,  消化 ,  ヒト ,  DNA組換 ,  *精神遅滞
準シソーラス用語： 脆弱X症候群蛋白質 ,  DNA配列解析 ,  細胞株 ,  *発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： fragile X mental retardation 1 gene (FMR1) ,  eukaryotic expression ,  HeLa cells ,  immunofluorescence

分類 (1件)： 細胞生理一般  (EF02010S)

タイトルに関連する用語 (6件)： 脆弱 ,  精神発達遅滞 ,  遺伝子 ,  発現ベクター ,  構築 ,  応用