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J-GLOBAL ID：201702217479976515   整理番号：17A0173280

古典的核局在化シグナルペプチドを併用した超音波照射は,遺伝子トランスフェクションを促進するための実験的研究である。【JST・京大機械翻訳】

Study of ultrasound targeted microbubble destruction combined classic nuclear localization signal peptide for facilitating gene transfection

著者 (6件)： Cao Sheng (Department of Ultrasound, Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Zhou Qing (Department of Ultrasound, Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Wang Yijia (Department of Ultrasound, Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Jiang Nan (Department of Ultrasound, Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Hu Bo (Department of Ultrasound, Renmin Hospital of Wuhan University) ,  Guo Ruiqiang (Department of Ultrasound, Renmin Hospital of Wuhan University)
資料名： Zhonghua Chaosheng Yingxiang Xue Zazhi  (Zhonghua Chaosheng Yingxiang Xue Zazhi)
巻： 25  号： 9  ページ： 808-813  発行年： 2016年 
JST資料番号： C3106A  ISSN： 1004-4477  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】古典的核局在化シグナルペプチド(CNLS)と結合した超音波破壊(破壊)技術を用いて,標的遺伝子核を促進し,トランスフェクション効率を向上させる。【方法】強化緑色蛍光蛋白質プラスミド(PEGFP)を異なる方法で293T細胞に形質移入した。実験は4群に分けた。UTMD+PEGFP(対照群),UTMD+PEGFP+CNLS(典型的群)。UTMD+PEGFP+MNLS(突然変異群)とUTMD+PEGFP+CNLS+WGA(核群)。NLSとPEGFPはそれぞれFITCとCY3で標識した。トランスフェクションの6時間後に,フローサイトメトリーによりCY3陽性細胞のパーセンテージを検出し,レーザー共焦点顕微鏡により細胞核内のCY3蛍光強度が全細胞の蛍光強度のパーセンテージをプラスミドの核とすることを観察した。トランスフェクション48時間後,フローサイトメトリーによりトランスフェクション効率を測定し,CCK8により細胞生存率を測定し,RT-PCRとWESTERN BLOTによりそれぞれMRNAと蛋白の相対発現量を測定した。4つの群の間の差異を比較して,UTMD媒介遺伝子トランスフェクションにおけるCNLSの役割を評価した。結果:(1)6時間のトランスフェクション後、緑色蛍光標識を持つNLSは細胞内の異なる部位において、典型的なグループの大量の核内核、,細胞質と核細胞はいずれも細胞質に集中し、核は遮断ないことが示された。(2)トランスフェクションの6時間後に,4つのプラスミドの入胞率は,それぞれ(61±11)%,(80±10)%,(55±9)%と(58±10)%であった。核は,それぞれ(20±4)%,(50±11)%,(18±3)%および(10±3)%であり,古典群および入胞率群で最も高く,核群で最も低かった(P<0.05)。3)48時間のトランスフェクションの後,4つの群の細胞活性は80%以上であった。トランスフェクション効率,MRNAおよび蛋白質の相対的発現は,経典組群で最も高く,核群で最も低かった(P<0.05)。【結語】UTMDと併用の併用は,PEGFP遺伝子のトランスフェクション効率を向上させることができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： プラスミド ,  *超音波 ,  蛍光標識 ,  突然変異 ,  *遺伝子導入 ,  フローサイトメトリー ,  *シグナルペプチド ,  RT-PCR法 ,  *トランスフェクション
準シソーラス用語： 細胞生存率 ,  蛍光強度 ,  293T細胞 ,  EGFP ,  トランスフェクション効率 ,  *核局在化 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Sonication ,  Microbubbles ,  Transfection ,  Gene ,  Nuclear localization signal

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (7件)： 核局在化シグナル ,  ペプチド ,  併用 ,  超音波照射 ,  遺伝子トランスフェクション ,  促進 ,  実験的研究